摘要生理学工作者在做离体蛙心灌流实验时,一直采用任格氏(英国生理学家Ringer)液灌流离体蛙心。任格氏液的理化特性很不稳定,影响实验效果。根据动物愈高等,血清蛋白愈复杂,血清营养愈丰富的原理,改用蟾蜍血清灌流液和家兔脱纤血清灌流液,做离体蛙心灌流试验,取得良好效果。其中家兔脱纤血清灌流液的效果最好,可防止蛙心停搏,提高其兴奋性;可节省时间,提高实验效率。
　　关键词离体蛙心灌流实验;任格氏灌流液;蟾蜍血清灌流液;家兔脱纤血清灌流液
　　中图分类号R-4文献标识码A 文章编号1673-9671-(2010)032-0009-01
　　
　　任格式液所含的成分没有动物血清复杂,而蟾蜍血清蛋白没有家兔血清蛋白复杂,其中的营养物质也没有家兔血清蛋白丰富。所以,用动物血清代替任格氏液灌流离体蛙心。
　　从任格氏倡导任氏液灌流离体蛙心以来,世界各国已沿用多年。任格氏液的理化特性易受各种因素的影响。尤其是在实验技术不熟练和实验条件差的情况下,出现不理想的效果。
　　经过反复试验,用动物血清做灌流液,取得了良好效果。能够提高离体心脏的兴奋性,增加心肌收缩力,缩短心搏反射时;又能够防止心肌疲劳和心脏停搏,保证实验顺利进行,提高实验效率。
　　1材料与方法
　　1.1材料
　　以家兔血清和蟾蜍血清为实验材料,用蟾蜍离体心脏为实验对象。分别采取蟾蜍动脉血和家兔心脏血,制备脱纤血清。
　　1.2方法
　　1)对照试验:用任氏液(R)与家兔血清(A1)、家兔蟾蜍混合血清(A2)、多只蟾蜍混合血清(A3)、蟾蜍和任氏液稀释血清(A4)、蟾蜍自家血清(A5)做灌流液,先后在记纹鼓上描记心搏曲线R1、A1、R2、A2、R3、A3、R4、A4、R5、A5。更换血清前后要用等量的任氏液冲洗心脏三次,再用任氏液做灌流液描记心搏曲线,曲线R后边的数字标明先后顺序,并与各种血清曲线A相互对应。
　　2)本实验:首先用任氏液做灌流描记心搏曲线R,再分别用家兔稀释血清(H)和任氏液(A)做灌流液,逐项做完离体蛙心实验的Na+、K+、Ca++、Ach各项实验;完成各项实验前后,用任氏液冲洗心脏,分别描记家兔稀释血清和任氏液的心搏曲线H1、A6、H2、A7、H3、A8、H4和A9,曲线H后边的数字标明顺序,与任氏液心搏曲线A相互对应。
　　分析和比较各条曲线R、A、H的波峰高度,心搏反射时,以此作为试验和观察的标准。
　　2结果与讨论
　　由对照试验结果可知:曲线A1—A5比曲线R1—R5的波峰明显升高,心搏反射时明显缩短,血清灌流的效果比任氏液的效果好,而各种血清灌流液的比较效果,按上述顺序降幂排列(见蟾蜍心搏曲线简介),其中以家兔血清灌流液的效果更好。由此说明:营养丰富的家兔血清能够明显地提高离体心脏的兴奋性和缩短心搏反射时,大幅度地增加心肌收缩力。
　　在试验中发现,家兔和蟾蜍的混合血清、多只蟾蜍的混合血清,在离体心脏内无不良反应,可做灌流液。由此可见,不同门类的动物和同种而不同个体的动物血清不发生凝集反应。因为除掉了红细胞;反之,若用家兔全血和蟾蜍全血混合或用多只蟾蜍全血混合,则蛙心套管的插管立即栓塞,出现心脏停搏。
　　采制动物血清十分方便,特别是采制蟾蜍血清,如果在采血前注入少量的任氏液,则能增加循环血量,效果更好。但必须注意,实行家兔采血时,不能用麻醉药和抗凝剂,否则,降低血清效果,立即使离体心脏停搏。另外,动物血清要随采随用,时间越短,效果越好。若超过12小时,即使放在低温处保存,也达不到新鲜血清的效果。也达不到新鲜血清的效果。
　　由本试验可知:家兔稀释血清比任氏液的效果好。用任氏液做灌流液时,离体蛙心受到各种离子和药液的作用后,兴奋性明显降低,表现为心肌疲劳,再用Ach作用,常常出现心脏停搏。用家兔稀释血清灌流,立即起死回生,防止停搏,便于急救。为离体心脏创造良好的环境,保证实验顺利进行。因此,用动物血清做灌流液,效果显著,效率高,便于应用。
　　
　　参考文献
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