牛磺酸促进生长受限胎鼠神经干细胞增殖

来源 :中华围产医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:newlifeinsydney
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目的 探讨牛磺酸对胎儿生长受限(fetal growth restriction,FGR)胎鼠神经干细胞(neural stem cell,NSC)增殖的影响. 方法 采用全程饥饿法,即仅给予对照组孕鼠正常饮食的40%制作FGR模型.将进行体内实验的SD孕鼠随机分为对照组5只、FGR组7只、牛磺酸组6只(FGR+牛磺酸),牛磺酸组除接受全程饥饿外,灌胃补充牛磺酸300 mg/ (kg·d),自孕7d开始至自然分娩.分娩后称取各组新生鼠出生体重、脑重;采用免疫组化检测各组新生鼠脑组织NSC中脂肪酸结合蛋白-7(fatty acid binding protein-7,FABP-7)的表达.将进行体外实验的孕鼠随机分为对照组和FGR组,造模方法同前,于孕14.5 d体外分离胎鼠NSC,培养5d后,采用免疫荧光细胞化学染色法检测FABP-7在原代NSC中的表达;用不同浓度的牛磺酸(5、10、15、20、30、40 mmol/L)处理NSC,采用CCK8试验检测各组细胞的增殖能力,计数各组单细胞.采用单因素方差分析、Kruskal-Wallis秩和检验、SNK检验和Tamhanes检验进行统计学分析.结果 FGR组新生鼠脑组织FABP-7阳性细胞面积(10 173±1 728)明显低于对照组(18 012±3 016),牛磺酸组新生鼠脑组织FABP-7阳性细胞面积(19 518±3 201)明显增加(F=200.8,P< 0.05).对照组和FGR组胎鼠均可分离培养出具备形成神经球能力的NSC,各组神经球均可表达FABP-7;细胞增殖能力检测显示,对照组增殖指数为1时,FGR组、FGR+5 mmol/L牛磺酸组、FGR+ 10 mmol/L牛磺酸组、FGR+15 mmol/L牛磺酸组、FGR+20 mmol/L牛磺酸组、FGR+30 mmol/L牛磺酸组、FGR+40 mmol/L牛磺酸组胎鼠NSC增殖指数分别为0.80±0.07、0.92±0.11、1.33±0.24、1.20±0.15、1.11±0.14、0.80±0.12和0.82±0.08,两两比较结果显示10、15、20 mmol/L浓度的牛磺酸组胎鼠NSC增殖指数明显高于FGR组(P均<0.01).对照组、FGR组、不同浓度牛磺酸组所得总细胞数依次为(24.50±0.60)×105、(20.23±1.09)×105、(22.80±0.86)×105、(27.53±1.22)×105、(25.30±1.05)×10 5、(22.70±0.72)×105、(21.81±1.80)×105和(18.06±0.90)×105,两两比较结果显示5、10、15、20 mmol/L浓度的牛磺酸组所得总细胞数明显高于FGR组(P< 0.01或0.05),而40 mmol/L浓度的牛磺酸组所得总细胞数低于FGR组(P<0.05). 结论 FGR胎鼠脑内NSC数量明显减少及体外增殖能力明显降低,产前补充牛磺酸可明显增加FGR胎鼠脑内NSC的数量及促进NSC体外增殖,且以10 mmol/L浓度促增殖效果较好.
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