尼基塔（Maggie Q扮演）曾经是一个性格叛逆、野性难驯的少女，因为犯下重罪，被联邦法院处以死刑。一家秘密间谍机构从死囚大牢中将尼基塔救出来，伪造了她的死亡，给予她“重生”的机会。没人知道这家间谍机构的真实来历，只知道它被称作“组织”。“组织”告诉尼基塔：要想活命，她就必须为她的祖国效命。但是他们没有告诉尼基塔，她将被训练成一个间谍、一个刺客。
　　在最关键的时刻，“组织”出卖了尼基塔。尼基塔这才发现，她自认为这世界上唯一可以相信的人竟然一直在欺骗她，令她伤心欲绝于是她离开了组织。在躲藏了三年之后，尼基塔突然重现江湖，向以前的雇主展开无情的报复——她决心不惜一切代价揭发他们的阴谋，彻底摧毁这个秘密组织。
　　组织并不会坐以待毙，当尼基塔离开后，他们便招募了一批新人，将他们训练成顶级杀手。其中，夏恩·韦斯特（Shane West）饰演的迈克尔（Michael）是组织中专门负责追捕尼基塔小组的负责人，这个小组中除了他之外，还有梅琳达·克拉克（Melinda Clarke）扮演的阿曼达（Amanda），她专门负责利用女性种种优势勾引敌人；亚伦·斯坦福（Aaron Stanford）扮演小组里的伯克霍夫（Birkhoff），他是一个热爱红牛饮料和马铃薯片的计算机专家。另外，山德·贝克利（Xander Berkeley）饰演组织负责人珀西（Percy）。
　　本剧根据1990年法国电影《尼基塔女郎》、1993年美国翻拍版电影《尼基塔：永不回头》及1997年由美国和加拿大联合制作的电视剧集《尼基塔女郎》改编而成。其中，电视剧集《尼基塔女郎》在美国的USA电视网和加拿大的CTV电视台播出了5季96集，2001年结束。《尼基塔女郎》和《双面女间谍》（Alias）并称为当代最杰出的女性间谍剧集，是后续同类剧集的标准和样板。
　　2010年CW电视网翻拍的《尼基塔》与原版电影及电视剧集仅存在松散联系，几乎没有直接相关的情节点。因此，不熟悉原版电影或电视剧集的观众不会发生理解障碍。在一个极其神秘的反恐怖组织的严格训练下，尼基塔在两年后已是一个身手不凡的特工人员。组织派她去暗杀一名恐怖分子，尼基塔却因没杀过人而下不了手。后来在又一次执行任务中，尼基塔为了救她的教官麦克尔打死了一名在暗处偷袭的恐怖分子，从而揭开了她一次次执行危险任务的序幕。她和麦克尔这一对情侣常常一道出生入死，默契配合，战胜一个又一个困难，从而完成了一次又一次的艰巨任务……