【摘 要】
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目的 探讨利金方对香烟提取物诱导的CD4+T细胞向Th17细胞分化及对炎症的影响及作用机制.方法 分离和培养CD4+T细胞,分为空白对照组、香烟烟雾提取物(CSE)组、(0.25、0.5、1.0
【机 构】
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广西中医药大学附属瑞康医院呼吸内科,广西南宁530021
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目的 探讨利金方对香烟提取物诱导的CD4+T细胞向Th17细胞分化及对炎症的影响及作用机制.方法 分离和培养CD4+T细胞,分为空白对照组、香烟烟雾提取物(CSE)组、(0.25、0.5、1.0)mg/mL利金方处理组、Janus激酶2(JAK2)抑制剂AG-490组、信号转导子和转录激活子3(STAT3)抑制剂TG-101348组.利金方处理组和抑制剂组都是先给予相应处理后再进行CSE刺激.流式细胞术检测各组CD4+T细胞、Th17细胞比例,ELISA检测CD4+T细胞培养基中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素17A(IL-17A)水平;实时定量PCR检测CD4+T细胞JAK2、STAT3、维甲酸相关孤核受体γt(ROR-γt)的mRNA水平,Western blot法检测CD4+T细胞JAK2、磷酸化的JAK2(p-JAK2)、STAT3、磷酸化的STAT3(p-STAT3)、ROR-γt的蛋白水平.结果 CSE处理增加Th17细胞/CD4+T细胞比值,培养基中TNF-α、IL-17A含量;ROR-γt的mRNA和蛋白表达增加,JAK2、STAT3磷酸化增加.利金方处理后降低Th17细胞/CD4+T细胞比值,减少TNF-α、IL-17A分泌,抑制ROR-γt的mRNA和蛋白表达以及JAK2、STAT3的磷酸化.结论 利金方通过抑制JAK2-STAT3-ROR-γt通路降低Th17细胞/CD4+T细胞比值减轻CSE诱导的炎症反应.
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