【摘 要】
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目的探讨褪黑素对脂多糖和缺血缺氧诱导的新生大鼠脑白质损伤的保护作用及机制。方法选择3日龄新生Sprague-Dawley（SD）大鼠72只，随机分为假手术组、模型组和褪黑素组各24只。假手术组仅游离右侧颈动脉、不进行结扎，不予低氧处理；模型组和褪黑素组采用脂多糖预处理 缺血缺氧法制作脑白质损伤动物模型。褪黑素组在注射脂多糖前1h和之后每天腹腔注射褪黑素15mg/kg，假手术组和模型组在相同时间点给予等体积含1%无水乙醇的生理盐水腹腔注射。实验第7天处死大鼠，取脑室周围白质，采用HE染色和TUNEL染色观察
【机 构】
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青岛大学附属医院新生儿科，青岛 266003青岛市立医院保健科，青岛 266071青岛大学附属医院新生儿科，青岛 266003青岛大学附属医院新生儿科，青岛 266003青岛大学附属医院新生儿科，青岛
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目的探讨褪黑素对脂多糖和缺血缺氧诱导的新生大鼠脑白质损伤的保护作用及机制。
方法选择3日龄新生Sprague-Dawley（SD）大鼠72只，随机分为假手术组、模型组和褪黑素组各24只。假手术组仅游离右侧颈动脉、不进行结扎，不予低氧处理；模型组和褪黑素组采用脂多糖预处理 缺血缺氧法制作脑白质损伤动物模型。褪黑素组在注射脂多糖前1 h和之后每天腹腔注射褪黑素15 mg/kg，假手术组和模型组在相同时间点给予等体积含1%无水乙醇的生理盐水腹腔注射。实验第7天处死大鼠，取脑室周围白质，采用HE染色和TUNEL染色观察脑白质损伤和凋亡情况，IBA1免疫荧光染色观察小胶质细胞分布和形态，活性氧（reactive oxygen species，ROS）试剂盒检测ROS水平，实时荧光定量聚合酶链反应检测核苷酸结合寡聚化结构域样受体3（nucleotide-binding domain-like receptor protein 3，NLRP3）炎症小体、白细胞介素（interleukin，IL）-1β、IL-18、PTEN诱导假定激酶1、帕金森病蛋白的表达情况。
结果与假手术组相比，模型组大鼠脑白质结构破坏、细胞变性坏死、细胞凋亡数量增加，脑白质NLRP3炎症小体及下游的IL-1β、IL-18等炎症因子表达增加；与模型组相比，褪黑素组脑白质损伤、细胞凋亡、小胶质细胞浸润情况减轻，炎症因子表达减少，脑白质线粒体自噬标志物PTEN诱导假定激酶1、帕金森病蛋白表达增加，ROS产生减少。
结论褪黑素通过增强线粒体自噬减少ROS的产生，从而抑制NLRP3炎症小体过度激活，缓解内毒素和缺血缺氧导致的新生大鼠脑白质损伤。
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