背景 视网膜Müller细胞具有为视网膜组织提供营养、维持视网膜的正常结构等多种生理功能,研究发现Müller细胞的病变会导致视网膜血管发生相应的改变.探讨高糖对视网膜Müller细胞的影响对于糖尿病视网膜病变(DR)的发病机制研究具有重要意义. 目的 研究不同浓度的葡萄糖对体外培养的视网膜Müller细胞活性的影响. 方法 取出生后10d清洁级SD大鼠的视网膜组织,用组织块培养法在含质量分数20％胎牛血清的DMEM培养液中体外原代培养Müller细胞并传代,取第3代细胞用免疫组织化学法对细胞进行鉴定.将不同浓度(5.5、30.0、40.0 mmol/L)的葡萄糖加入培养基中培养4d,MTT比色法测定各组波长570 nm处Müller细胞的吸光度(A570)值,计算各组细胞的相对存活率；采用流式细胞仪检测各组Müller细胞的凋亡率. 结果 培养的细胞贴壁生长,呈长梭形；95％以上细胞神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)反应阳性.MTT比色法检测显示,正常葡萄糖组及30.0 mmo/L、40.0 mmol/L葡萄糖处理组Müller细胞4570值分别为0.24±0.01、0.21±0.03和0.20±0.02,总体差异有统计学意义(F=6.755,P＜0.05).与正常葡萄糖组比较,30.0 mmol/L 、40.0 mmol/L葡萄糖处理组A570值均明显降低,差异有统计学意义(q=0.645、0.486,P＜0.05).流式细胞仪检测结果表明,正常葡萄糖组、30.0 mmol/L和40.0 mmol/L葡萄糖处理组Müller细胞凋亡率分别为(26.40±0.25)％、(30.19±0.16)％和(36.23±0.19)％,总体差异有统计学意义(F=294.530,P＜0.05),与正常葡萄糖组比较,30.0 mmol/L、40.0 mmol/L葡萄糖组凋亡率均明显升高,差异有统计学意义(q=0.754、0.484,P＜0.05). 结论 高浓度葡萄糖可抑制视网膜Müller细胞的生长并增加其凋亡率,葡萄糖的上述作用呈浓度依赖性。
高糖对体外培养的视网膜Müller细胞活性的影响
【摘 要】
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背景 视网膜Müller细胞具有为视网膜组织提供营养、维持视网膜的正常结构等多种生理功能,研究发现Müller细胞的病变会导致视网膜血管发生相应的改变.探讨高糖对视网膜Müller细胞的影响对于糖尿病视网膜病变(DR)的发病机制研究具有重要意义. 目的 研究不同浓度的葡萄糖对体外培养的视网膜Müller细胞活性的影响. 方法 取出生后10d清洁级SD大鼠的视网膜组织,用组织块培养法在含质量分数20
【机 构】
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430071武汉大学中南医院眼科,430071武汉大学中南医院眼科,430071武汉大学中南医院眼科
【出 处】
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中华实验眼科杂志
【发表日期】
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2012年30期
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