【摘 要】
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为研究低氧诱导因子1α(HIFlα)及其下游基因胰岛素样生长因子2(IGF-2)和血管内皮生长因子(VEGF)在注射孕马血清促性腺激素(PMSG)(促排组)的促排卵巢与注射生理盐水(对照组)
【机 构】
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南京农业大学动物科技学院,江苏南京210095
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为研究低氧诱导因子1α(HIFlα)及其下游基因胰岛素样生长因子2(IGF-2)和血管内皮生长因子(VEGF)在注射孕马血清促性腺激素(PMSG)(促排组)的促排卵巢与注射生理盐水(对照组)的普通卵巢组织中的mRNA转录水平,构建小鼠HIFlα基因真核表达载体,观察其转染的小鼠颗粒细胞中HIFlα基因的表达情况,以探讨HIFlα与小鼠卵泡发育的关系.用荧光定量PCR检测不同处理组织中HIFlα、VEGF及IGF-2 mRNA转录水平,免疫组化技术定位HIFlα在卵泡中的表达,基因重组技术构建HIFl α-pcDNA3.1真核表达载体并将其转染小鼠颗粒细胞,荧光定量PCR与Western blot技术检测转染细胞中HIFlα表达情况.结果表明:HIFlα在促排小鼠卵巢中的mRNA转录水平极显著高于普通小鼠卵巢组织(P＜0.01),在促排组和对照组的其他组织内HIFlα mRNA转录水平并无显著差异;HIFl下游基因VEGF和IGF-2在促排小鼠卵巢组织中的转录水平分别显著(P＜0.05)与极显著(P＜0.01)高于普通小鼠卵巢组织中的转录水平;卵泡发育至有腔卵泡后,HIFlα才开始在卵泡中表达;HIFlα-pcDNA3.1真核表达载体能够在颗粒细胞中转录HIFlα mRNA并翻译成蛋白.结论:HIFlα只在有腔卵泡内表达,其转录水平与卵巢内有腔卵泡数量成正相关,HIFlα通过上调VEGF和IGF-2参与卵泡的发育及成熟.
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