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介绍一种人类小肠上皮细胞原代培养方法。采用16-24周引产胎儿小肠,比较3种小肠上皮细胞分离方法,探讨最佳培养条件。结果发现应用胶原酶/中性蛋白酶消化可获满意的上皮细胞分离效果,细胞贴壁良好。培养10 ̄12d细胞达到融合,并保持对碱性磷酸酶的表达。提示小肠上皮细胞繁殖十分依赖于培养基和底物质量。