银染-TRAP法检测端粒酶活性的建立

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目的建立检测端粒酶活性的改良银染TRAP法(端粒重复序列扩增法)。方法用银染TRAP法测定人肿瘤细胞株和经加热处理的阴性对照细胞的端粒酶活性。结果肿瘤细胞株的端粒酶活性阳性率为100%,10、100、500个Hela细胞均为阳性,加热处理后的细胞端粒酶活性均为阴性。结论提示与核素TRAP法相比较,银染TRAP法是同样特异、敏感,且更快速的端粒酶活性的检测方法,该方法可成为恶性肿瘤的诊断指标之一。 Objective To establish a modified silver staining-TRAP method for detecting telomerase activity (telomere repeat sequence amplification). Methods The telomerase activity of human tumor cell lines and heat-treated negative control cells was determined by silver staining-TRAP assay. Results The positive rate of telomerase activity in tumor cell lines was 100%, and all of 10, 100, and 500 Hela cells were positive. The heat-treated cells were all negative for telomerase activity. Conclusions Compared with the radionuclide-TRAP assay, the silver-stained TRAP assay is a specific, sensitive, and more rapid method for the detection of telomerase activity, which can be one of the diagnostic indicators of malignancy.
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