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【摘要】目的：探讨补中益气汤及其拆方的免疫调节作用。方法：将NIH小鼠随机分组进行研究，并测定NK、IL-2及IFN-γ活性。结果：高剂量补中益气汤能明显提高脾虚小鼠NK活性、IL-2活性和IFN-γ活性，并可使它们恢复至接近正常水平(P>0.05)；整方和拆方Ⅰ能协同ConA明显提高脾虚小鼠IL-2活性，并均使之恢复至接近正常水平(P>0.05)。结论：补中益气汤中各药通过良好的配伍关系达到全面调节机体免疫功能作用，而非简单的相加作用。
【关键词】补中益气汤；拆方；免疫调节
Makes up benefits was mad the soup and its opens the side the immunity control action
HUANG Qiu-ping
【Abstract】goal：The discussion makes up benefits was mad the soup and its opens the side the immunity control action. Method：Conducts the research the NIH mouse stochastic grouping，and determines NK，IL-2 and the IFN- gamma activeness. Finally：The high dosage makes up benefits was mad the soup can obviously enhance spleen weakness mouse NK activeness，the IL-2 activeness and the IFN- gamma activeness，and may make them to restore to approaches the normal level (P> 0.05)；and opens the side I to be able to cordinate ConA obviously to enhance spleen weakness mouse IL-2 activeness，and makes it to restore to approaches the normal level (P> 0.05). Conclusion：Makes up benefits was mad in the soup various medicines achieve the comprehensive adjustment organism immunity function through the good relations，but non- simple adds together the function.
【Key word】makes up benefits is mad the soup；Opens the side；Immunity adjustment
本文通过对已报道的补中益气汤方剂进行拆方研究，探讨补中益气汤中各个组方部分在免疫药理效应中所起的作用并与整方作比较。现将研究结果报道如下。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 实验药品。补中益气汤及拆方各组药物的组成(单位：g)：①补中益气汤组(整方)：黄芪150、人参75、白术75、炙甘草35、陈皮45、当归75、柴胡22.5、升麻22.5，按常规分别制成160%、100%、80%、20%药液，4℃保存。②健脾益气组(拆方Ⅰ)：黄芪45、人参22、白术22、炙甘草11。③补血理气组(拆方Ⅱ)：当归63、陈皮37。④升阳举陷组(拆方Ⅲ)：升麻50、柴胡50。以上3组按常规制成100%药液，4℃保存。
大黄水煎剂：大黄(北京同仁堂药店提供)粉碎成粗粉，水煎提取，过滤，制成100%浓度(g/ml) 的水煎液备用。
1.1.2 实验动物及细胞。雄性NIH小鼠，体重(21.1±2.2)g，G57BL/6小鼠，6 周～8周龄。小鼠成纤维细胞(L929)、YAC-1细胞、滤泡性口炎病毒(VSV)。
1.2 实验方法
1.2.1 动物分组及给药。NIH小鼠在正常喂药三天后，将其随机分为两大组，即大黄脾虚模型组(简称脾虚组)和正常组。脾虚组胃饲1kg/L大黄水煎剂0.5ml/(只·天)，连续8天，正常组胃饲等量蒸馏水。第9天开始，整方研究是将正常及脾虚组动物再各分为4组，3个剂量组每鼠分别胃饲补中益气汤5g/kg、20g/kg、40g/kg，0.5ml/天，对照组则以等量蒸馏水代替，连续12天。拆方研究则将正常及脾虚组动物又随机各分为5组(包括对照组、整方及拆方Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组)，给补中益气汤及各拆方的剂量均为25g/kg 0.5ml/(只·天)，对照组则以等量蒸馏水代替，连续12天。
1.2.2 NK活性测定。采用3H-TdR标记靶细胞(YAC-1)法，NK活性用3H-TdR释放率(%)表示。
1.2.3 IL-2活性测定。采用激活的淋巴母细胞增殖3H-TdR掺入法，IL-2活性用刺激指数(SI)表示。
1.2.4 IFN-γ活性测定。采用微量细胞病变抑制法，IFN -γ活性用Log2U/200μl表示。
1.3 统计方法。在WindowsXP下使用SPSS 13.0对各项资料进行统计、分析；各项参数以均值±标准差(x? ±s)表示，采用t检验、卡方检验、方差分析进行显著性分析。
2 结果
2.1 补中益气汤对小鼠NKC-IL-2-IFN-γ免疫调节网络的作用。测定各组小鼠脾细胞的NK活性、脾细胞培养上清的IL-2及IFN-γ活性。具体结果如表1所示。
* 与正常组比较有显著性差异，P<0.05；
#与脾虚组比较有显著性差异，P<0.05；
!与正常组比较有显著性差异，P>0.05。
2.2 补中益气汤的整方及拆方对小鼠的IL-2及IFN-γ活性作用。本研究选择IL-2、IFN-γ两种细胞因子为组方和拆方进行研究的指标，结果如表2所示。
与脾虚组比较：* P<0.01；
与正常组比较：# P<0.01，! P>0.05
3 讨论
补中益气汤源于李东垣的《脾胃论》，由人参、黄芪、白术、当归、柴胡、升麻、陈皮、甘草8味药组成，适用于脾虚下陷，中气不足诸症。补中益气汤是传统的补气升阳方剂。近年来的临床应用较多地反映了本方对免疫系统疾病的治疗作用，尤其是对免疫功能低下的疾病具有较好的疗效[1]。近年来许多学者从多方面对中药复方的配伍理论进行了探索和研究，其中拆方是研究中药复方组方原理的重要手段之一。
本研究表明：首先，脾虚小鼠NK、IL-2及IFN-γ活性均明显低于正常小鼠(P<0.05) 即NKC-IL-2-IFN-γ免疫调节网水平明显下降，说明大黄脾虚模型建立。其次，在3个剂量组中，40g/kg组能明显提高脾虚小鼠NK活性、IL-2活性和IFN-γ活性，并可使它们恢复至接近正常水平(P>0.05)。最后，整方和拆方Ⅰ能协同ConA明显提高脾虚小鼠IL-2活性，并均使之恢复至接近正常水平(P>0.05)。整方和拆方Ⅰ对ConA诱导脾虚小鼠产生IFN-γ均有明显促进作用。对正常小鼠除拆方Ⅰ能提高IL-2活性外，整方及其3个拆方均无影响。
据文献报道，补中益气汤可促使乙肝病毒血清学标志好转，明显促进肝组织修复，改善机体整体的抗病机能[2]。为病人补缺微量元素、维生素、叶酸、蛋白质等[3]。明显恢复脾虚小鼠低下的非特异性免疫功能，调节脾脏及胸腺指数、红细胞免疫功能、NK细胞活性、腹腔巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子(TNF)的活性[4]。可降低消化性溃疡血浆ET-1含量，有抗乙酰胆碱、5- 羟色胺、组织胺、氯化钡的作用，显著增强机体免疫系统功能[5]。
综上所述，补中益气汤中各药通过良好的配伍关系达到全面调节机体免疫功能作用，而非简单的相加作用。
参考文献
[1] 陈余健.补中益气汤的药理研究进展.陕西中医，1994(1)：36
[2] 张庆红，谷洪燕.补中益气汤在日本的临床应用[J].中草药，1995，26(5)：274～275
[3] 刘善庭，李秀英.补中益气汤治疗男性不育症机理[J].中医研究，1995，8(1)：49～52
[4] 米娜，陈其御，吴敏毓.补中益气汤对小鼠非特异性免疫功能的影响[J].中国中西医结合脾胃杂志，1999，7(4)：206～208
[5] 路辉，王炎焱，张春芳.补中益气汤对消化性溃疡血浆ET-1含量影响及其临床意义[J].中国中西医结合脾胃杂志，2000，8(6)：373
作者单位：510000 广东省中医院
【关键词】补中益气汤；拆方；免疫调节
Makes up benefits was mad the soup and its opens the side the immunity control action
HUANG Qiu-ping
【Abstract】goal：The discussion makes up benefits was mad the soup and its opens the side the immunity control action. Method：Conducts the research the NIH mouse stochastic grouping，and determines NK，IL-2 and the IFN- gamma activeness. Finally：The high dosage makes up benefits was mad the soup can obviously enhance spleen weakness mouse NK activeness，the IL-2 activeness and the IFN- gamma activeness，and may make them to restore to approaches the normal level (P> 0.05)；and opens the side I to be able to cordinate ConA obviously to enhance spleen weakness mouse IL-2 activeness，and makes it to restore to approaches the normal level (P> 0.05). Conclusion：Makes up benefits was mad in the soup various medicines achieve the comprehensive adjustment organism immunity function through the good relations，but non- simple adds together the function.
【Key word】makes up benefits is mad the soup；Opens the side；Immunity adjustment
本文通过对已报道的补中益气汤方剂进行拆方研究，探讨补中益气汤中各个组方部分在免疫药理效应中所起的作用并与整方作比较。现将研究结果报道如下。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 实验药品。补中益气汤及拆方各组药物的组成(单位：g)：①补中益气汤组(整方)：黄芪150、人参75、白术75、炙甘草35、陈皮45、当归75、柴胡22.5、升麻22.5，按常规分别制成160%、100%、80%、20%药液，4℃保存。②健脾益气组(拆方Ⅰ)：黄芪45、人参22、白术22、炙甘草11。③补血理气组(拆方Ⅱ)：当归63、陈皮37。④升阳举陷组(拆方Ⅲ)：升麻50、柴胡50。以上3组按常规制成100%药液，4℃保存。
大黄水煎剂：大黄(北京同仁堂药店提供)粉碎成粗粉，水煎提取，过滤，制成100%浓度(g/ml) 的水煎液备用。
1.1.2 实验动物及细胞。雄性NIH小鼠，体重(21.1±2.2)g，G57BL/6小鼠，6 周～8周龄。小鼠成纤维细胞(L929)、YAC-1细胞、滤泡性口炎病毒(VSV)。
1.2 实验方法
1.2.1 动物分组及给药。NIH小鼠在正常喂药三天后，将其随机分为两大组，即大黄脾虚模型组(简称脾虚组)和正常组。脾虚组胃饲1kg/L大黄水煎剂0.5ml/(只·天)，连续8天，正常组胃饲等量蒸馏水。第9天开始，整方研究是将正常及脾虚组动物再各分为4组，3个剂量组每鼠分别胃饲补中益气汤5g/kg、20g/kg、40g/kg，0.5ml/天，对照组则以等量蒸馏水代替，连续12天。拆方研究则将正常及脾虚组动物又随机各分为5组(包括对照组、整方及拆方Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组)，给补中益气汤及各拆方的剂量均为25g/kg 0.5ml/(只·天)，对照组则以等量蒸馏水代替，连续12天。
1.2.2 NK活性测定。采用3H-TdR标记靶细胞(YAC-1)法，NK活性用3H-TdR释放率(%)表示。
1.2.3 IL-2活性测定。采用激活的淋巴母细胞增殖3H-TdR掺入法，IL-2活性用刺激指数(SI)表示。
1.2.4 IFN-γ活性测定。采用微量细胞病变抑制法，IFN -γ活性用Log2U/200μl表示。
1.3 统计方法。在WindowsXP下使用SPSS 13.0对各项资料进行统计、分析；各项参数以均值±标准差(x? ±s)表示，采用t检验、卡方检验、方差分析进行显著性分析。
2 结果
2.1 补中益气汤对小鼠NKC-IL-2-IFN-γ免疫调节网络的作用。测定各组小鼠脾细胞的NK活性、脾细胞培养上清的IL-2及IFN-γ活性。具体结果如表1所示。
* 与正常组比较有显著性差异，P<0.05；
#与脾虚组比较有显著性差异，P<0.05；
!与正常组比较有显著性差异，P>0.05。
2.2 补中益气汤的整方及拆方对小鼠的IL-2及IFN-γ活性作用。本研究选择IL-2、IFN-γ两种细胞因子为组方和拆方进行研究的指标，结果如表2所示。
与脾虚组比较：* P<0.01；
与正常组比较：# P<0.01，! P>0.05
3 讨论
补中益气汤源于李东垣的《脾胃论》，由人参、黄芪、白术、当归、柴胡、升麻、陈皮、甘草8味药组成，适用于脾虚下陷，中气不足诸症。补中益气汤是传统的补气升阳方剂。近年来的临床应用较多地反映了本方对免疫系统疾病的治疗作用，尤其是对免疫功能低下的疾病具有较好的疗效[1]。近年来许多学者从多方面对中药复方的配伍理论进行了探索和研究，其中拆方是研究中药复方组方原理的重要手段之一。
本研究表明：首先，脾虚小鼠NK、IL-2及IFN-γ活性均明显低于正常小鼠(P<0.05) 即NKC-IL-2-IFN-γ免疫调节网水平明显下降，说明大黄脾虚模型建立。其次，在3个剂量组中，40g/kg组能明显提高脾虚小鼠NK活性、IL-2活性和IFN-γ活性，并可使它们恢复至接近正常水平(P>0.05)。最后，整方和拆方Ⅰ能协同ConA明显提高脾虚小鼠IL-2活性，并均使之恢复至接近正常水平(P>0.05)。整方和拆方Ⅰ对ConA诱导脾虚小鼠产生IFN-γ均有明显促进作用。对正常小鼠除拆方Ⅰ能提高IL-2活性外，整方及其3个拆方均无影响。
据文献报道，补中益气汤可促使乙肝病毒血清学标志好转，明显促进肝组织修复，改善机体整体的抗病机能[2]。为病人补缺微量元素、维生素、叶酸、蛋白质等[3]。明显恢复脾虚小鼠低下的非特异性免疫功能，调节脾脏及胸腺指数、红细胞免疫功能、NK细胞活性、腹腔巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子(TNF)的活性[4]。可降低消化性溃疡血浆ET-1含量，有抗乙酰胆碱、5- 羟色胺、组织胺、氯化钡的作用，显著增强机体免疫系统功能[5]。
综上所述，补中益气汤中各药通过良好的配伍关系达到全面调节机体免疫功能作用，而非简单的相加作用。
参考文献
[1] 陈余健.补中益气汤的药理研究进展.陕西中医，1994(1)：36
[2] 张庆红，谷洪燕.补中益气汤在日本的临床应用[J].中草药，1995，26(5)：274～275
[3] 刘善庭，李秀英.补中益气汤治疗男性不育症机理[J].中医研究，1995，8(1)：49～52
[4] 米娜，陈其御，吴敏毓.补中益气汤对小鼠非特异性免疫功能的影响[J].中国中西医结合脾胃杂志，1999，7(4)：206～208
[5] 路辉，王炎焱，张春芳.补中益气汤对消化性溃疡血浆ET-1含量影响及其临床意义[J].中国中西医结合脾胃杂志，2000，8(6)：373
作者单位：510000 广东省中医院