乙型脑炎病毒SA14—14—2株E基因的克隆、测序与表达

来源 :中国人兽共患病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：a69ywc97

【摘要】

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目的克隆乙型脑炎病毒E基因并在大肠杆菌中进行表达,为今后研制乙脑分子诊断试剂盒和基因工程疫苗奠定基础.方法根据乙型脑炎病毒株SA14-14-2E基因的序列设计一对引物,采用RT

【作者】

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徐高原陈焕春徐晓娟李自力孙圣福何启盖吴斌

【机构】

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华中农业大学动物医学院

【出处】

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中国人兽共患病杂志

【发表日期】

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2004年1期

【关键词】

：

乙型脑炎病毒 SA14—14—2株 E基因克隆测序表达 Japanese encephalitis virus JEV E gene RT-PCR clo

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目的克隆乙型脑炎病毒E基因并在大肠杆菌中进行表达,为今后研制乙脑分子诊断试剂盒和基因工程疫苗奠定基础.方法根据乙型脑炎病毒株SA14-14-2E基因的序列设计一对引物,采用RT-PCR技术扩增其E基因全长cDNA,将扩增产物克隆到pBlusecriptIISK(+)载体中,然后亚克隆到原核表达载体PGEX-KG中,筛选重组质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)表达重组蛋白.结果与结论获得了含全长乙型脑炎病毒E基因的重组质粒,经酶切和测序证实构建正确.表达的目的蛋白经SDS-PAGE和Western blot

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