【摘 要】
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目的:探讨缺氧对人牙周膜细胞（human periodontal ligament cells,hPDLCs）生物学活性的影响。方法:选择第5代hPDLCs,在严重缺氧（1%O2）、轻度缺氧（5%O2）和常氧（21%O2）3种环境下培养,用
【机 构】
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重庆医科大学附属口腔医院修复科、口腔疾病与生物医学重庆市重点实验室;
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(编号:81700982);重庆市卫生局高端人才资助项目(编号:2015HBRC010);重庆市医学科研计划资助项目(编号:2013-2-071);重庆市渝北区科技计划资助项目(编号:2016(社)18号)
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目的:探讨缺氧对人牙周膜细胞（human periodontal ligament cells,hPDLCs）生物学活性的影响。方法:选择第5代hPDLCs,在严重缺氧（1%O2）、轻度缺氧（5%O2）和常氧（21%O2）3种环境下培养,用MTT法评价细胞增殖率,用倒置显微镜观察细胞形态变化,细胞划痕试验评价细胞迁移能力,用免疫荧光染色染色研究细胞中低氧诱导因子-1（hypoxia inducible factor-1,HIF-1）的表达及分布情况,用RT-PCR及Western blot检测HIF和IGF-1在不同氧浓度环境下的mRNA及蛋白表达水平。结果:①与正常hPDLCs相比,在1%O2浓度下,hPDLCs的数量在一个显微镜视野下明显减少,排列稀疏,结构发生改变。②hPDLCs的增长速率随着氧浓度的下降而减少,氧气浓度越低,增殖速率越慢。③在划痕处理后72 h,在3组不同氧浓度下,hPDLCs均向划痕区域迁移,但严重缺氧组的移动速率明显小于轻度缺氧和常氧组（划痕72 h:1%O2组0.917±0.023,5%O2组0.742±0.046,21%O2组0.453±0.039,F=530.237,P=0.002）。④HIF/DAPI染色结果显示在常氧条件下,HIF-1主要表达在细胞质中,随着氧气浓度降低,HIF逐渐转移至细胞核内。结论:缺氧能够抑制人牙周膜细胞的增殖和迁移能力,改变hPDLCs的形态。在缺氧条件下,HIF从细胞质转移到细胞核中,HIF和IGF-1的表达增加,提示缺氧微环境对人牙周膜细胞的生物学活性有一定影响。
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