【摘 要】
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目的 研究白杨素对高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞(HRMECs)损伤的影响,并探讨其机制是否与调控长链非编码RNA(lncRNA)生长抑制特异性转录本5(GAS5)表达有关.方法 采用30 mmol/L葡萄糖诱导HRMECs建立细胞损伤模型.将细胞分为9组:正常组(NC)、高糖组(HG)、白杨素低剂量组(LCG)、白杨素中剂量组(MCG)、白杨素高剂量组(HCG)、pcDNA组、pcDNA-GAS5组、HCG+GAS5小干扰RNA(si-GAS5)组、HCG+si-NC组.采用CCK-8法和流式细胞术分
【机 构】
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广西中医药大学附属瑞康医院眼科,南宁530011
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目的 研究白杨素对高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞(HRMECs)损伤的影响,并探讨其机制是否与调控长链非编码RNA(lncRNA)生长抑制特异性转录本5(GAS5)表达有关.方法 采用30 mmol/L葡萄糖诱导HRMECs建立细胞损伤模型.将细胞分为9组:正常组(NC)、高糖组(HG)、白杨素低剂量组(LCG)、白杨素中剂量组(MCG)、白杨素高剂量组(HCG)、pcDNA组、pcDNA-GAS5组、HCG+GAS5小干扰RNA(si-GAS5)组、HCG+si-NC组.采用CCK-8法和流式细胞术分析细胞活力和凋亡,检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性以及丙二醛(MDA)含量,实时定量PCR检测GAS5表达量.结果 (1)GAS5表达:HG组与NC组比较降低(t=45.322,P=0.000),与MCG组比较降低(t=17.391,P=0.000),与HCG组比较降低(t=36.363,P=0.000),差异均有统计学意义;(2)MDA含量:HG组与NC组比较升高(t=36.123,P=0.000),与MCG组比较升高(t=7.510,P=0.002),与HCG组比较升高(t=27.228,P=0.000);pcDNA组与pcDNA-GAS5组比较升高(t=24.231,P=0.000);HCG+si-GAS5组与HCG+si-NC组比较升高(t=21.766,P=0.000),差异均有统计学意义;(3)SOD活性:HG组与NC组比较降低(t=26.923,P=0.000),与MCG组比较降低(t=12.231,P=0.000),与HCG组比较降低(t=22.654,P=0.000);pcDNA组与pcDNA-GAS5组比较降低(t=29.259,P=0.000);HCG+si-GAS5组与HCG+si-NC组比较降低(t=19.410,P=0.000),差异均有统计学意义;(4)凋亡率:HG组与NC组比较升高(t=36.811,P=0.000),与MCG组比较升高(t=8.896,P=0.001),与HCG组比较升高(t=24.091,P=0.000);pcDNA组与pcDNA-GAS5组升高(t=26.321,P=0.000);HCG+si-GAS5组与HCG+si-NC组比较升高(t=14.135,P=0.000),差异均有统计学意义;(5)细胞活力(48 h、72 h):HG组与NC组比较降低(t48h=9.507,P=0.001;t72h=16.089,P=0.000),与MCG组比较降低(t48h=4.406,P=0.012;t72h=6.689,P=0.003),与HCG组比较降低(t48h=7.884,P=0.001;t72h=12.835,P=0.000);pcDNA组与pcDNA-GAS5组比较降低(t48h=7.323,P=0.002;t72h=13.244,P=0.000);HCG+si-GAS5组与HCG+si-NC组比较降低(t48h=4.909,P=0.008;t72h=9.581,P=0.001),差异均有统计学意义.结论 白杨素能够减弱高糖诱导的HRMECs凋亡和氧化应激损伤,其机制可能是通过上调lncRNA GAS5表达实现的.
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