目的 探讨晚期糖基化终产物受体(RAGE)特异性小干扰RNA(siRNA)在肝纤维化中对纤维化标志物[层粘连蛋白、透明质酸、血清Ⅲ型前胶原(PⅢNP)]生成的影响.方法 构建RAGE特异性siRNA表达载体pAKD-GR126,分离培养原代大鼠肝星状细胞(HSC),将重组载体转染入原代大鼠HSC,以空白组和转染非特异性siRNA表达载体pAKD-NC组为对照,分别用PCR法和Western免疫印迹法检测各组原代HSC RAGE、层粘连蛋白、透明质酸、PⅢNP mRNA及蛋白的表达.正态分布及方差齐性资料采用方差分析(LSD)及SNK法两两比较,非正态分布及方差不齐资料采用非参数秩和检验.结果 转染特异性siRNA表达载体pAKD-GR126的原代HSCRAGE mRNA和蛋白的表达率分别为空白组和pAKD-NC组的(42.32±6.16)％、(43.24±7.50)％和(51.06±13.79)％、(47.94±5.36)％(F=7.791,36.513;P均＜0.05)；层粘连蛋白mRNA和蛋白的表达率分别为空白组和pAKD-NC组的(41.07±3.13)％、(40.59±5.87)％和(53.89±2.25)％、(52.46±4.68)％(F=225.111,88.039;P均＜0.05)；透明质酸mRNA和蛋白的表达率分别为空白组和pAKD-NC组的(45.69±0.87)％、(46.08±2.36)％和(54.20±0.56)％、(52.30±3.42)％(F=178.317,180.646;P均＜0.05)；PⅢNP mRNA和蛋白的表达率分别为空白组和pAKD-NC组的(56.10±4.18)％、(55.15±2.39)％和(54.40±2.79)％、(53.58土6.18)％(F=141.633,49.670；P均＜0.05).结论 RAGE特异性siRNA可抑制原代大鼠HSC RAGE基因的表达,并能显著降低纤维化标志物(层粘连蛋白、透明质酸、PⅢNP)基因及蛋白的表达。
晚期糖基化终产物受体特异性小干扰RNA抑制肝星状细胞表达初探
【摘 要】
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目的 探讨晚期糖基化终产物受体(RAGE)特异性小干扰RNA(siRNA)在肝纤维化中对纤维化标志物[层粘连蛋白、透明质酸、血清Ⅲ型前胶原(PⅢNP)]生成的影响.方法 构建RAGE特异性siRNA表达载体pAKD-GR126,分离培养原代大鼠肝星状细胞(HSC),将重组载体转染入原代大鼠HSC,以空白组和转染非特异性siRNA表达载体pAKD-NC组为对照,分别用PCR法和Western免疫印迹
【机 构】
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210009南京,东南大学附属中大医院消化内科,210009南京,东南大学附属中大医院消化内科
【出 处】
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中华消化杂志
【发表日期】
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2013年33期
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