目的 采用实时定量PCR(RQ-PCR)和流式细胞术(FCM)建立机采血小板(AP-PCs)中白细胞碎片(LFs)的定量检测方法,并探讨保存时间、是否过滤和PLT浓度等因素对LFs含量的影响.方法 选取合格献血者67名,各采集AP-PCs 1个治疗剂量,并尽快留取标本.然后将每份标本分成6份,其中1份用于血液分析仪检测,另外5份分别于采集后4 h内、24、48、72、96 h时,分别在过滤前后和离心前后等不同状态下进行4次DNA抽提.然后运用RQ-PCR对所抽提DNA中人类白蛋白基因进行定量测定,并换算成白细胞当量(WBCs/μl).完整白细胞用FCM进行计数.LFs含量通过从总DNA含量中减去游离DNA含最和完整白细胞含量而算出,比较不同保存时间组和过滤前后组间LFs含量的差别.并按照PLT浓度的不同进行分组,比较不同PLT浓度组间过滤前LFs含量的差别.同时对PLT浓度和LFs含量进行双变量相关分析.结果 所有AP-PCs标本中LFs含量均被成功检测.过滤前LFs含量在采集后4 h内、24、48、72、96 h分别为(31.4±17.6)、(47.5±25.3)、(100.7±53.5)、(89.5±47.2)和(16.1±7.8)WBCs/μl,过滤后分别为(16.9±8.7)、(24.3±12.2)、(83.1μ42.6)、(78.2±40.2)和(13.6±6.6)WBCs/μl,不同保存时间组间LFs含量差异有统计学意义(F组内=472.756,P<0.01).LFs含量在采集后48 h内呈上升趋势,此后逐渐下降,其峰值出现在血小板采集后48～72 h之间.过滤前后LFs含最差值在4 h内、24、48、72、96 h分别为14.5、23.2、17.6、11.3和2.5 WBCs/μl,过滤前后差异有统计学意义(F组间=9.216,P<0.05),其差值在48 h内较大,随后逐渐减小.双变量相关分析结果显示,PLT浓度与LFs含量之间不呈相关关系,采集后4 h内、24、48、72、96 h相关系数rs分别为-0. 002、0. 015、0.027、0.042和0.037,P双侧均>0. 05.结论 RQ.PCR和FCM可用于AP-PCs中LFs的定量检测,AP-PCs中LFs含量受保存时间和过滤因素的影响,但不受PLT浓度的影响。