【摘 要】
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目的:探索山奈素是否通过circ-RPL15影响肺癌细胞A549的生物行为.方法:使用25、50和75μg/mL山奈素处理肺癌细胞A549.在细胞A549中沉默circ-RPL15,或过表达circ-RPL15并使用75μg/mL山奈素处理.采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测各组肺癌细胞A549活力变化,平板克隆法检测细胞克隆形成,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质印迹(Western blot)法检测裂解-含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved-caspase3)蛋白的表达,使用Transwe
【机 构】
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杭州师范大学附属医院 结核科,浙江 杭州 310015;浙江大学医学院附属杭州市第一人民医院 检验科,浙江 杭州 310006
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目的:探索山奈素是否通过circ-RPL15影响肺癌细胞A549的生物行为.方法:使用25、50和75μg/mL山奈素处理肺癌细胞A549.在细胞A549中沉默circ-RPL15,或过表达circ-RPL15并使用75μg/mL山奈素处理.采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测各组肺癌细胞A549活力变化,平板克隆法检测细胞克隆形成,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质印迹(Western blot)法检测裂解-含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved-caspase3)蛋白的表达,使用Transwell法检测细胞迁移,并使用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测circ-RPL15、miR-489-3p表达.双荧光素酶报告实验分析circ-RPL15对miR-489-3p的靶向调控.结果:与对照组相比,不同质量浓度(25、50和75μg/mL)山奈素作用于肺癌细胞A549后,细胞活力、克隆形成数、迁移数、circ-RPL15表达量降低,而凋亡率、Cleaved-caspase3蛋白和miR-489-3p的表达量升高(P<0.05),且均呈浓度依赖性.沉默circ-RPL15增强肺癌细胞A549的miR-489-3p表达量、凋亡率和Cleaved-caspase3蛋白的表达量,并减弱细胞活力、克隆形成数、迁移数(P<0.05).circ-RPL15靶向调控miR-489-3p.过表达circ-RPL15逆转了山奈素作用的肺癌细胞增殖、凋亡和迁移情况(P<0.05).结论:山奈素通过下调circ-RPL15并靶向调控miR-489-3p,抑制肺癌细胞的增殖和迁移,并诱导其凋亡.
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