【摘 要】
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目的 从气道炎症和气道屏障损伤角度探索清肺颗粒通过干预TLR4/NF-KB信号通路调控慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠气道损伤的作用机制.方法 SD大鼠60只,随机选取10只为正常组,其余50只大鼠均采用香烟烟雾(CS)暴露联合气管注射脂多糖(LPS)的方法建立COPD模型.造模成功后,将上述50只大鼠随机分为模型组,地塞米松组(灌胃地塞米松0.2mg/kg),清肺低、中、高剂组(分别灌胃清肺颗粒5.4g/kg、10.8g/kg、21.4g/kg),每组10只,共灌胃8周.测定大鼠肺功能变化情况,透射电镜
【机 构】
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上海中医药大学附属市中医医院 上海 200071;上海中医药大学 上海 201203;静安区北站医院 上海 200070
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目的 从气道炎症和气道屏障损伤角度探索清肺颗粒通过干预TLR4/NF-KB信号通路调控慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠气道损伤的作用机制.方法 SD大鼠60只,随机选取10只为正常组,其余50只大鼠均采用香烟烟雾(CS)暴露联合气管注射脂多糖(LPS)的方法建立COPD模型.造模成功后,将上述50只大鼠随机分为模型组,地塞米松组(灌胃地塞米松0.2mg/kg),清肺低、中、高剂组(分别灌胃清肺颗粒5.4g/kg、10.8g/kg、21.4g/kg),每组10只,共灌胃8周.测定大鼠肺功能变化情况,透射电镜下观察肺脏亚显微结构改变;ELISA法测定血清及支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞因子[包括转化生长因子β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)、血管内皮生长因子(VEGF)、结缔组织生长因子(CTGF)、内皮素-1(ET-1)]含量;qRT-PCR法测定肺组织中微小RNA-146a(miRNA-146a)、Toll样受体4(TLR4)、核转录因子-κB(NF-κB)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)mRNA的表达情况;Western blot法测定肺组织TLR4、NF-κB、Bcl-2、Bax的蛋白表达水平.结果 ①与模型组比较,清肺颗粒各组的肺通气功能有所改善,表现为0.2 s用力呼气容积(FEV0.2)/用力肺活量(FVC)水平均有所上升(P＜0.05),而RL和Re水平有不同程度下降(P＜0.05),且清肺高剂组对大鼠肺功能FEV0.2和FEV0.2/FVC水平的改善程度与地塞米松组相似(P＞0.05).②通过透射电子显微镜下观察,与模型组比较,清肺高剂组的Ⅱ型肺泡上皮细胞胞浆质地均匀,核膜未见明显破坏,可见较多线粒体和板层小体,细胞形态大多正常.③与模型组比较,清肺颗粒可降低大鼠血清和BALF液中TNF-α、IL-8水平(P＜0.05),且中、高剂量组具有一定的剂量依赖关系.④与模型组比较,清肺颗粒可上调miRNA-146a mRNA表达,降低大鼠肺组织TLR4、NF-κB、Bax mRNA和其蛋白表达量,上调Bcl-2 mRNA和其蛋白表达量(P＜0.05).结论 清肺颗粒可通过抑制TLR4/NF-κB信号通路相关mRNA及蛋白表达,抑制肺泡上皮细胞凋亡,进而达到修复气道屏障损伤的作用.
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