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构建乙型脑炎病毒减毒株SA14-14-2包膜蛋白第315位氨基酸(E315)回复突变株，并分析该位点回复突变株在小鼠体内的神经毒力变化。
方法采用重叠PCR扩增含基因组第1921核苷酸位点回复突变的基因片段，替换SA14-14-2全长克隆的相应区域，获得回复突变株M315。通过比较SA14-14-2与突变株的噬斑大小和一步生长曲线，分析M315的增殖特征。采用小鼠模型测定该突变株的脑内神经毒力、皮下感染入脑能力、腹腔感染入脑能力和乳鼠传代返祖能力，分析疫苗株E315位点回复突变后毒力的变化。
结果成功构建了回复突变株M315，其噬斑大小和增殖特征与疫苗株相似。M315对17～19日龄小鼠无皮下或腹腔感染入脑神经毒力，鼠脑病毒有很低但可检测的脑内神经毒力〔小于3.0 lg噬斑形成单位(plaque forming unit，PFU)/0.03 ml〕，皮下注射不致病。3～5日龄乳鼠脑内接种后发病，但脑内病毒毒力低于3.0 lgPFU/0.03 ml。
结论在分子水平证明了E315位点是影响乙型脑炎疫苗安全性的关键位点之一，但影响较小。E315位点的回复突变虽使SA14-14-2的小鼠脑内神经毒力和乳鼠传代返祖能力增强，但没有超出中国药典规定的毒力范围。