【摘 要】
：
目的研究应用载体表达短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)干扰技术抑制人T淋巴细胞白血病细胞株Jurkat细胞survivin基因的表达,探讨survivin基因表达缄默对Jurkat细胞凋亡和
【机 构】
：
广州,广西壮族自治区人民医院病理科
论文部分内容阅读
目的研究应用载体表达短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)干扰技术抑制人T淋巴细胞白血病细胞株Jurkat细胞survivin基因的表达,探讨survivin基因表达缄默对Jurkat细胞凋亡和增殖的影响.方法构建针对survivin基因的shRNA重组质粒并转染至Jurkat细胞,分别用多重PCR和Western blot法检测瞬时转染和稳定转染细胞survivin基因mRNA和蛋白表达水平的变化;流式细胞术检测瞬时转染和稳定转染细胞凋亡指数的变化,绘制细胞生长曲线,探讨survivin shRNA转染对细胞生长和增殖的影响.结果多重PCR结果示与无功能(对照组)shRNA处理组和磷酸盐缓冲液处理组比较,survivin shRNA瞬时转染和稳定转染细胞survivin基因mRNA表达均显著下降,抑制率分别为66.67%和60.69%(P＜0.05);Western blot结果显示survivin shRNA瞬时转染和稳定转染细胞survivin蛋白表达水平亦显著降低,抑制率分别为63.41%和60.18%(P＜0.05).流式细胞术检测瞬时转染和稳定转染细胞的凋亡率显著增加,分别为(22.41±2.83)%和(20.73±2.56)%(与对照组比较,P均＜0.05),细胞倍增时间显著延长.生长曲线显示稳定转染细胞的生长显著减慢.结论shRNA重组质粒介导的RNA干扰能明显抑制Jurkat细胞survivin基因mRNA和蛋白产物的表达,诱导细胞凋亡和生长抑制.
其他文献
目的探讨多巴胺β羟化酶(DβH)基因编码区589位单核苷酸多态性(SNP)与妊娠期高血压疾病发病的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,检测10
本文针对数字电视信息化管理系统建设,提出了以SOA为基础架构的总体解决方案.此方案重点强调面向服务的架构,通过特定方法组织各服务组件,达到以较低成本实现系统松耦合、高
目的 探讨改变退火温度对甲基特异性聚合酶链反应PCR检验指标有效性的影响.方法 将经测序证实的RASSF1A甲基化标本分别作为完全甲基化(100%M)和完全未甲基化的标本(0%M),按1
工程制图是所有工科学生必修的一门重要的基础课,如何将传统的板书教学法和现代多媒体教学相结合,取得最佳的教学效果是我们追求的目标.文章将分析板书教学与多媒体教学的特
目的探讨常染色体显性遗传成人癫癎、震颤伴共济失调的临床特征并排除已知的致病基因.方法对可追溯6代130人的一家系的30名成员(包括11例患者)进行详细的神经系统检查,通过查
本论文阐述了系统客错和负载平衡与传统石油工业相结合的应用方法,介绍了一种全新的远程数据决策集成系统可靠运行的安全措施.从理论上讲,它的应用不仅为高层领导的决策提供
工会是企业与职工之间的桥梁和纽带,它的基本职责就是促进企业发展、维护本企业职工群众的合法权益.文章拟就工会小组民主管理为研究对象,探索工会小组的民主管理及其作用,推
为了保证大功率YO750偶合器在高转速运行条件下的设计合理性,用有限元模型分别对其叶轮的强度进行了计算,验证了叶轮强度的可靠性。指出叶轮最大应力部位并提出结构优化方案,
当前Internet广泛使用的网络协议是IPV4协议,目前的IPV4协议已越来越不能适应Internet发展的要求。IPV6是下一代互联网的核心通信协议。基于IPV6的网络己经在一定范围内存在,
目的尝试对老年性下睑内翻的手术方法进行改良,力求简单易学,对患者损伤小。方法利用卧位下自然注视眼位判断切除松弛的下睑的皮肤量。不破坏肌鞘膜,将睑板前轮匝肌束下移固