嗜肺军团菌ip基因的克隆及其原核表达

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目的 克隆嗜肺军团菌主要免疫原蛋白ip基因,构建重组质粒pET—ip,并在原核系统中表达。方法 采用聚合酶链反应(PCR),从嗜肺军团菌基因组DNA中扩增军团菌主要免疫原蛋白ip基因,并将其定向克隆至原核表达载体pET-32a(+),构建原核表达重组质粒pET-ip,经限制性内切酶鉴定、PCR及测序分析后,转化宿主菌大肠杆菌BL21,WIG诱导表达,产物进行SDS—PAGE电泳、免疫印迹分析鉴定。结果 扩增出了792 bp完整的如基因,构建的原核表达重组质粒per—ip表达出49 kDa Trx-IP的融
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