构建小鼠Fcγ receptor Ⅱ-b (FcγRⅡb)胞外区蛋白原核表达载体pET-FcγRⅡb，诱导表达并纯化，观察其在系统性红斑狼疮(SLE)疾病中的预防与治疗作用。
方法PCR扩增获得小鼠FcγRⅡb基因，并将其定向克隆至原核表达载体pET-32a(＋)，构建原核表达重组质粒小鼠pET-FcγRⅡb，经PCR、限制性内切酶鉴定及测序分析正确后，转化大肠杆菌BL21(DE3)，IPTG进行诱导蛋白表达，确定最佳诱导条件，经Western blot鉴定正确后，纯化目的蛋白。ELISA法检测纯化蛋白与小鼠血清中免疫复合物的结合能力。将MRL/lpr SLE小鼠预防组(周龄12周左右)和治疗组(周龄19周左右)各40只随机分成蛋白液60 μl组(4.8 μg)、120 μl组(9.6 μg)、180 μl (14.4 μg)组以及对照PBS组4组，每组10只，通过尾静脉注射将蛋白液注射进入MRL/lpr SLE小鼠体内，连续注射4周，每周1次。注射完成后，观察1周并收集血清，用ELISA法对预防组与治疗组SLE小鼠的可溶性FcγRⅡb的含量以及小鼠抗双链DNA抗体含量进行检测。
结果扩增出了小鼠FcγRⅡb基因，成功构建原核表达重组质粒小鼠pET-FcγRⅡb，IPTG诱导表达并纯化出重组蛋白。重组蛋白与小鼠血清具有结合力；预防组和治疗组蛋白组(含60 μl、120 μl和180 μl组)分别与预防对照组和治疗对照组相比可溶性FcγRⅡb含量增加(P<0.05)，蛋白组(含60 μl、120 μl和180 μl组)两两比较，差异有统计学意义(P均<0.05)；小鼠抗双链DNA抗体含量检测结果显示预防组和治疗组蛋白组(含60 μl、120 μl和180 μl组)分别与预防和治疗对照组相比，小鼠抗双链DNA抗体含量降低(P<0.05)；预防和治疗蛋白组(含60 μl、120 μl和180 μl组)分别进行两两比较后发现随着蛋白注射剂量的增加，小鼠抗双链DNA抗体含量逐渐降低(P<0.05)。
结论获得重组小鼠FcγRⅡb胞外区可溶性蛋白，初步证实其对SLE模型鼠具有一定的预防和治疗作用。