松杉灵芝液体发酵培养营养条件优化探讨

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  摘 要:松杉灵芝数子菌纲多孔菌科目中的内容,又被称为木灵芝,多产于黑龙江区域、吉林区域与甘肃区域,具备较高的营养价值与保健价值,对人体有着润肺平喘、抑制血脂与提升免疫力的作用,在抗肿瘤方面的应用较为广泛。因此,为了满足人们的健康需求,应针对松杉灵芝液体发酵培养进行分析,针对营养条件进行优化,生产质量较高的营养保健产品。
  关键词:松杉灵芝;液体发酵培养;营养条件优化
  在松杉灵芝液体发酵培养的过程中,需根据具体内容进行处理,掌控相关作用,并利用合理方式分析问题与解决问题,建立多元化与现代化的管理机制,保证在实际处理的过程中,针对营养条件进行合理优化,满足当前的发展需求。
  1 分析材料与方式
  对于松杉灵芝而言,其生长周期较长,且生长的效率很低,在产品制作的过程中,质量呈现不稳定的特征,会导致研究效果受到影响。因此,需做好试验工作,利用合理的方式对其处理。
  1.1 试验材料分析
  本次试验主要采用的为松杉灵芝1号菌株,由某生物实验室对其进行保存与处理。所选择的试剂为葡萄糖试剂、乙醇试剂、蛋白胨试剂、菌母浸膏试剂、蔗糖试剂、琼脂试剂、磷酸二氢钾试剂、硫酸镁试剂、维生素B1。联合玉米粉产品、麦麸产品、豆饼粉产品对其处理,并选择丙酮、无水乙醚对其进行研究与试验,通过合理方式做好工作。在选择仪器设备的过程中,主要应用烧杯,三角瓶、往复式振荡筛、无菌操作箱、旋转蒸发仪设备、冷冻离心机设备、冷冻干燥机设备、超净工作台设备、电子分析天平设备、真空干燥箱设备等。在实际使用的过程中,需针对机械设备质量进行全面管理与严格协调,保证其使用价值,增强管理效果,满足当前的实际使用要求,达到预期的处理目的。
  对于斜面培养基而言,主要使用的为综合PDA培养基,其中为去皮马铃薯(200g)、葡萄糖(20g)、琼脂(20g)、水(1000ml),在120摄氏度的环境下灭菌30分钟。选择种子培养基,其中为土豆200g、葡萄糖30g、蛋白胨2g、酵母浸膏2g、磷酸二氢钾(1g)、硫酸镁(1g)、维生素B1(10mg)1片、水,在120摄氏度的环境中灭菌30分钟。在选择发酵培养基的过程中,其中为葡糖糖、玉米粉、麦麸、蛋白胨、酵母浸膏、硫酸镁、磷酸二氢钾、维生素B1、水,在120摄氏度的环境中灭菌30分钟。
  1.2 试验方式
  在试验的过程中,需做好种子培养工作,明确为液体的发酵培养方式,全面收集菌丝体,以便于提升试验效果。
  第一,在种子培养的过程中,需针对活化斜面的菌种进行分割,使其形成蚕豆大小的块体,并在无菌环境中对其进行接种,以便于将其融入液体中更好的进行培养,将液体的剂量控制在250ml,将三角瓶的液量设置成为80ml,在28摄氏度的环境中保存七天左右。第二,在对液体发酵进行培养的过程中,可将已经培养成功的种子筛选10%的剂量,并接种在500ml剂量的三角瓶中,保证装液量为180ml,并在相同条件之下对其进行继续培养,时间为六天左右。第三,在收集菌丝的时候,应将发酵液放置在离心杯设备中,将其规格设计在4000r每分钟左右,离心的时间为十分钟,并针对菌丝进行沉淀处理,使用蒸馏水对其冲洗,保证实际处理的效果。同时,还要做好蒸馏水的冲洗工作,将其设置在六十摄氏度温度环境中衡量重量,做好生物量的计算工作,保证可以提升处理效果,满足菌丝的实际处理符合规定。第四,在胞外粗多糖提取的过程中,需针对过滤之后的发酵液实施真空浓缩处理,使其转变成为原来体积的20%,并在浓缩期间,在发酵液中添加3倍左右体积的乙醇,保证在4摄氏度环境中放置处理,在过夜之后,需对发酵液进行离心处理,将规格设置在4000r每分钟左右,离心时间为五分钟,使其形成沉淀反应。针对沉淀冷冻干燥情况,获得粗多糖提取物,然后对其获得率进行计算,以此提升处理效果。
  表1 正交实验因素与水平分析
  2 相关结果分析
  在试验之后,需针对结果进行全面的分析,明确各方面要求与原则,利用合理的方式解决问题,创建现代化与多元化的控制机制,保证能够创建良好的营养条件。
  2.1 不同碳源对营养条件的影响
  在实际处理的过程中,可将葡萄糖试剂、可溶性淀粉产品、蔗糖产品、玉米粉产品与乳糖产品等融合在一起,替代培养基中的碳源,并保证其他成分没有变化,以便于对生物量进行测量,保证结果的准确性与可靠性。在实际培养的过程,不同碳源会对菌丝的生长产生不同影响,应对其进行合理的分析与明确,根据菌丝生物量进行分析,并对玉米粉与蔗糖等全面了解。虽然将玉米粉作为碳源进行培养不能保证可溶性淀粉的使用效果,但是,能够提升发酵液的处理水平,保证菌球的均匀性与合理性,明确具体的内容。对于玉米粉而言,其中含有较多核苷酸物质与纤维素物质,可以诱导灵芝中的胞外多糖的良好合成,明确具体的情况。在此期间,需针对培养成本进行综合的探讨,明确具体内容与要求,并将玉米粉作为碳源进行处理,以便于增强各方面的处理效果,协调相关工作之间的关系。
  2.2 不同氮源对于营养条件的影响
  在对营养条件进行优化的过程中,应选择合理的碳源,并对其进行严格的控制,将蛋白胨成分、麦麸成分、氯化铵成分、硝酸铵成分等作为液态培养期间的培养基氮源,利用摇床对其进行,在成分不变的情况下,能够更好的测定生物量与相关粗多糖的数量。经过相关研究可以得知,不同氮源对于松杉灵芝液体培养会造成一定影响,应合理筛选相关氮源进行处理,保证实际使用量。对于蛋白胨与麦麸成分而言,在使用期间多糖获得率较高,由于麦麸成分在实际采购的过程中成本较高,因此,需对培养基的造价进行综合探讨,明确具体的多糖情况,并利用资源控制的方式对其处理,将麦麸作为最主要的氮源进行处理,以此增强分析与控制效果,满足当前的发展需求[1]。
  2.3 无机盐对于菌丝生物量的影响
  经过相关研究可以得知,在最合適的氮源与碳源之下,无机盐会对菌丝的生物量产生一定影响,应明确具体成分的情况,并在成分不变的情况下,测定其中的粗多糖成分,明确含量信息与数据,保证工作效果。在实际处理期间,应添加少量的无机盐成分,对其合理的研究与分析,明确成分特点[2]。
  2.4 正交试验对营养条件的影响
  在实际培养的过程中,应科学使用正交试验的方式对其处理,利用科学的培养基方式形成现代化的管理机制,在与无交试验与正交试验相互作用的情况下,形成准确的结果。在此期间,需针对玉米粉的浓度进行严格控制,保证麦麸的浓度符合相关规定,并合理使用摇瓶的方式对其处理,明确具体多糖获得率,对其进行严格的分析,保证形成良好的营养条件[3]。
  3 结束语
  对于松杉灵芝液体发酵培养而言,与传统培养方式相较的生产周期较短,省工省力,生物利用度高。且容易对其质量进行控制,只需针对培养液营养条件进行优化,从而得到优质的松杉灵芝产品。以便于将松杉灵芝产品应用在食品领域、药品领域与化妆品领域中。
  参考文献
  [1]于海洋,弥春霞,陈欢等.松杉灵芝液体发酵培养营养条件优化[J].北方园艺,2015(4):152-156.
  [2]李爱欣,许利婷,张术影等.松杉灵芝发酵物对乙醇诱导小鼠胃溃疡的保护作用研究[J].食品与发酵科技,2015,51(3):37-40,43.
  [3]于海洋.松杉灵芝多糖的发酵和提取条件优化及抗氧化活性研究[D].牡丹江师范学院,2015.
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