【摘 要】
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构建具有不同类型和长度的5非编码区(UTR)及3UTR的丙型肝炎病毒(HCV)全长cDNA克隆,体外转录制备RNA,转染肝癌细胞HepG2,研究不同RNA转录体在细胞内的复制情况.通过RT-PCR与We
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构建具有不同类型和长度的5非编码区(UTR)及3UTR的丙型肝炎病毒(HCV)全长cDNA克隆,体外转录制备RNA,转染肝癌细胞HepG2,研究不同RNA转录体在细胞内的复制情况.通过RT-PCR与Western blot等方法证明:蛋白编码区来源于1a基因型并具有1b型5UTR及3UTR(全长或缺失98nt保守区)的2种嵌合型HCV RNA,都可以在病毒易感细胞中复制和表达;而以脑心肌炎病毒(FMCV)内核糖体进入位点(IRES)替代HCV5UTR的嵌合型RNA转染细胞,检测不到病毒正、负链RNA与蛋白表达.以上结果说明HCV1b型5UTR与3UTR可以支持1a型病毒RNA的正常复制,3UTR保守区的存在与否,对病毒复制影响不大.
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