【摘 要】
：
目的构建无凝血活性的重组小鼠凝血因子Ⅶ(rmFⅦ)毕赤酵母分泌型表达载体,获得高拷贝稳定整合菌株,为大量获得rmFⅦ蛋白,进行功能研究及其临床应用奠定基础.方法 PCR 扩增得
论文部分内容阅读
目的构建无凝血活性的重组小鼠凝血因子Ⅶ(rmFⅦ)毕赤酵母分泌型表达载体,获得高拷贝稳定整合菌株,为大量获得rmFⅦ蛋白,进行功能研究及其临床应用奠定基础.方法 PCR 扩增得到mFⅦ基因片段,插入酵母表达载体pPIC9K的α分泌信号开放阅读框的下游, 再经定点突变(K341A)得到pPIC9K-rmFⅦ,测序正确的质粒用Sac Ⅰ线性化后电穿孔转化毕赤酵母GS115,G418梯度筛选转化菌,PCR 鉴定目的基因的整合.结果获得了rmFⅦ毕赤酵母表达载体pPIC9K-rmFⅦ,G418 抗性筛选得到高拷贝菌株,PCR 证实目的基因已整合到毕赤酵母染色体中.结论成功构建了rmFⅦ毕赤酵母表达载体,获得了高拷贝稳定整合菌株,为大规模表达纯化rmFⅦ蛋白及后续研究奠定了基础.
其他文献
目的 评价糖尿病患者血糖水平对肾小球滤过率(GFR)公式估算结果的影响;比较不同血糖水平Cockcroft-Gauh(CG)公式和MDRD公式法估算GFR对诊断肾功能不全的差异.方法 选取1210例
介绍了适用于超高压变电站自动化系统的新型测控装置,阐述了测控装置硬件、软件结构以 及提高测控装置配置灵活性、操作控制及闭锁安全性的设计方法。
The new measurement
分析了发电机气隙磁势、磁导、磁密、定子绕组两条并联支路的感应电势和电路方程,得到定子绕组并联支路间的电压差表达式.通过分析正常及故障运行时各参数的变化得到了并联支
0 前言导向钻进技术一直是非开挖技术领域占据主导地位并且发展最快的一种技术.为了确保避开原有地下管线及障碍物,准确、顺利地完成铺管任务,除了导向仪器的研制之外,钻孔轨
继易卜生之后享誉世界剧坛的挪威剧作家约恩·弗思,其剧作具有老一代荒诞派作家塞缪尔·贝克特式的“等待”主题和哈罗德.品特式的“威胁”主题。
Johann Firth, a Norwegia
凯瑟琳·杰米是活跃在当今诗坛的一位苏格兰女诗人,她获奖众多。杰米的诗歌主题涵盖广泛,从女性身份、苏格兰民族文化身份到全人类所共同面对的生态问题。广泛的主题细腻的观
高热负荷固体激光介质的热效应已经成为制约激光器功率进一步提高的严重障碍,只有对激光介质进行有效的冷却才能保证其安全运行.以不均匀换热系数模型为基础,研究了具有非均
依据金属橡胶多孔材料的制备工艺及节流特性,确定了影响金属橡胶节流元件流体动压特性的影响参数。利用相似性定理中的量纲相似理论(π定理),推导出了决定圆柱形金属橡胶多孔
本文主要从三个方面对刘尚恒先生所作《鲍廷博年谱》一书进行评介。通过对该书主要内容、核心思想、编排形式等各方面进行分析,笔者认为该书主要有三个显著的特点:首先,作者
阿奇·布朗是当代英国俄罗斯东欧研究领域的重要代表人物。他坚持运用传统的历史研究方法,在苏联、俄罗斯转型方面形成了一套系统而独特的观点。他认为苏联改革源于体制内部