【摘 要】
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目的:探究高核苷酸酵母水解物的体外抗氧化活性.方法:采用化学法测定高核苷酸酵母水解物对二苯代苦味酰基自由基(DPPH)和羟自由基的清除能力及总还原力.建立游离脂肪酸(FFA)
【机 构】
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吉林农业大学食品科学与工程学院 长春 130118中国食品发酵工业研究院有限公司 北京 100015;吉林工程技术师范学院食品工程学院 长春 130052;大连双迪科技股份有限公司 辽宁大连 1166
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目的:探究高核苷酸酵母水解物的体外抗氧化活性.方法:采用化学法测定高核苷酸酵母水解物对二苯代苦味酰基自由基(DPPH)和羟自由基的清除能力及总还原力.建立游离脂肪酸(FFA)诱导HepG2细胞氧化应激模型,采用噻唑蓝溴化四唑(MTT)法检测高核苷酸酵母水解物对HepG2细胞的活力影响,荧光探针DCFH-DA法检测HepG2细胞内活性氧的变化,商业试剂盒检测细胞内氧化损伤标志物丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活力.实时定量PCR检测keap1,Nrf2,HO-1和NQO-1的mRNA表达水平.免疫印迹检测Nrf2活化与转位情况.结果:5～50 mg/mL高核苷酸酵母水解物以质量浓度依赖性方式清除体外活性氧自由基,具有显著抗氧化能力.500～1000μg/mL高核苷酸酵母水解物可显著降低细胞内丙二醛(MDA)的含量,降低活性氧自由基(ROS)水平,提高细胞中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活性.抗氧化酶基因NQO1,Nrf2和HO-1的mRNA表达水平显著增加,keap1 mRNA表达水平显著降低.高核苷酸酵母水解物能够显著增加HepG2细胞核内Nrf2的蛋白质含量,降低其胞浆中的蛋白质含量,进一步阐明高核苷酸酵母水解物通过激活Nrf2通路减轻FFA诱导的HepG2氧化应激损伤作用.
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