【摘 要】
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目的 初步探讨PI3K/Akt/mTOR和MAPK/ERK信号通路在胃癌细胞生长中的协同作用.方法 采用不同浓度的PI3K/Akt/mTOR和MAPK/ERK信号通路抑制剂rapamycin与PD98059分别单独及联合
【机 构】
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东南大学公共卫生学院环境医学工程教育部重点实验室,江苏南京,210009
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目的 初步探讨PI3K/Akt/mTOR和MAPK/ERK信号通路在胃癌细胞生长中的协同作用.方法 采用不同浓度的PI3K/Akt/mTOR和MAPK/ERK信号通路抑制剂rapamycin与PD98059分别单独及联合作用于胃癌细胞SGC-7901.采用CCK8法检测SGC-7901细胞增殖情况;实时荧光定量PCR检测关键基因mRNA的表达;蛋白印迹法(WB)检测相关蛋白的表达;流式细胞术检测细胞周期和凋亡的变化.结果 Rapamycin(12.5、25、50、100、150、200 nmol/L)与PD98059(25、50、100、200、300、400 μmol/L)单独作用可抑制SGC-7901细胞增殖活性,联合作用也可抑制其活性,且联合组的抑制作用强于单独作用(P＜ 0.05).与rapamycin、PD98059单独作用相比,联合组对AKT、mTOR、MEK、ERK基因mRNA表达和p-AKT、p-mTOR、p-MEK1/2、p-ERK1/2蛋白表达的抑制作用明显增强(P＜0.05).联合组阻滞于G0/G1期的细胞比例显著增多,且具有更强的促凋亡作用.结论 PI3K/Akt/mTOR和MAPK/ERK信号通路在胃癌细胞生长中具有一定的协同调控作用.
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