大鼠γ—干扰素基因转染大鼠肺泡巨噬细胞和气道上皮细胞的实验研究

来源 :第三军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wxg1984
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目的构建重组大鼠γ-干扰素真核表达载体,探讨其转染大鼠肺泡巨噬细胞(AM)和气道上皮细胞的可行性及表达水平.方法采用RT-PCR技术克隆了大鼠γ-干扰素,并将其定向克隆到逆转录病毒载体pLXSN上,构成真核表达重组载体.将重组载体转染培养的AM和气道上皮细胞.用PCR法鉴定重组载体整合在细胞基因组DNA中.并检测细胞培养上清中γ-干扰素浓度和活性.结果 DNA测序证明,构建的重组载体中γ-干扰素的基因方向正确,DNA序列与GeneBank中大鼠的γ-干扰素cDNA序列相同.转染后AM和气道上皮细胞基因组D
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