敲低环状RNA mmu_circ_0001775可提高小鼠骨髓间充质干细胞的成骨能力

来源 :中国组织工程研究 | 被引量 : 0次 | 上传用户:whbniuniu
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背景:近年来利用环状RNA(circRNA)调控干细胞分化成为新的研究热点,将circRNA负载于骨髓间充质干细胞研究其成骨性能,为研发骨缺损修复新型材料具有重要意义.目的:探讨敲低circRNA mmu_circ_0001775对骨髓间充质干细胞成骨能力的影响.方法:生物信息学分析工具推测miR-335-5p关系最为密切的上游circRNA为mmu_circ_0001775,将敲低mmu_circ_0001775的慢病毒、阴性对照病毒转染至骨髓间充质干细胞.qRT-PCR检测各组细胞成骨诱导7,14 d时Runt相关转录因子2、骨钙素、miR-335-5p及mmu_circ_0001775的表达水平,验证其成骨作用,Western blot检测骨形态发生蛋白2、骨桥蛋白的表达.结果 与结论:LV-mmu_circ_0001775-BMMSCs组各时间点Runt相关转录因子2、骨钙素表达高于LV-BMMSCs组(P<0.01),骨形态发生蛋白2、骨桥蛋白相对表达量均明显高于LV-BMMSCs组(P<0.05).结果 表明,敲低环状RNA mmu_circ_0001775有利于提高骨髓间充质干细胞的成骨能力.
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背景:骨髓间充质干细胞在体外培养传代过程中存在细胞老化现象,但其机制尚不明确.组蛋白去乙酰化酶可以使组蛋白脱乙酰化而使染色质处于浓缩状态,进一步关闭基因.目的:探讨骨髓间充质干细胞衰老过程中组蛋白去乙酰化酶9的表达模式.方法:通过生物信息学挖掘技术分析组蛋白去乙酰化酶在骨髓间充质干细胞中的表达;通过体外传代培养骨髓间充质干细胞,β-半乳糖甘酶染色和qRT-PCR方法检测其衰老状态,qRT-PCR、Western blot及免疫荧光技术检测组蛋白去乙酰化酶9的表达模式.结果 与结论:①数据挖掘、生物信息学分