【摘 要】
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将含有pET29a-prouk重组质粒的人尿激酶原工程菌经10 L种子罐培养及100L发酵,IPTG诱导表达,其表达量为占菌体总蛋白的20%,表达产物经体外变复性,CM-纤维素离子交换层析,Super
【机 构】
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南京大学分子医学研究所,Landing
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将含有pET29a-prouk重组质粒的人尿激酶原工程菌经10 L种子罐培养及100L发酵,IPTG诱导表达,其表达量为占菌体总蛋白的20%,表达产物经体外变复性,CM-纤维素离子交换层析,Superdex 75分子筛层析及Affi-prep polymyxin support亲和层析去热源,每100L发酵液得重组人尿激酶原纯品6 g,纯度达95%以上,比活大于1.2×104IU/mg,双链含量低于0.5%,内毒素及热源含量、宿主蛋白残留量、宿主DNA残留量等均达到临床使用标准.其分子量(质谱测
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