【摘 要】
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目的:探讨GCN5调控sublytic C5b-9刺激大鼠肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cell,GMC)诱导Cyclin D1基因表达以及GCN5乙酰化修饰SOX9转录因子的作用.方法:先用Western b
【机 构】
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南京医科大学免疫学系,江苏南京211166
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目的:探讨GCN5调控sublytic C5b-9刺激大鼠肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cell,GMC)诱导Cyclin D1基因表达以及GCN5乙酰化修饰SOX9转录因子的作用.方法:先用Western blot检测Thy-1肾炎(Thy-1 nephritis,Thy-1N)大鼠的肾组织和sublytic C5b-9刺激的GMC中GCN5、SOX9和Cyclin D1的表达.然后分别将pIRES2-GCN5过表达和shGCN5小干扰质粒或将这些质粒与Cyclin D1启动子质粒行不同组合转染GMC,用荧光素酶报告基因实验和real-time PCR、Western blot检测过表达或沉默GCN5后对Cyclin D1表达的影响.同时用免疫共沉淀(Co-IP)和Western blot检测sublytic C5b-9刺激或分别转染GCN5过表达和酶活性突变质粒(△GCN5)的GMC中SOX9的乙酰化修饰.结果:Thy-1N大鼠肾组织和sublytic C5b-9刺激的GMC中GCN5、SOX9、CyclinD1蛋白水平均明显上调,而过表达GCN5基因能上调CyclinD1的启动子活性、mRNA和蛋白表达;敲低GCN5表达则得到了相反的结果.此外,sublytic C5b-9刺激和过表达GCN5基因促进了SOX9的乙酰化修饰,而沉默GCN5后则降低了SOX9的乙酰化水平.结论:GCN5可上调GMC中CyclinD1的表达,并促进SOX9的乙酰化修饰.
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