砷染毒对神经细胞凋亡及calpain 1,calpain 2和edk5/p25基因和蛋白表达的影响

来源 :中华劳动卫生职业病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cntt_nj
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目的 探讨砷对神经细胞凋亡、calpain1和calpain2以及cdk5/p25基因和蛋白表达的影响,为As2O3神经毒性机制研究提供科学依据。方法原代培养的大鼠神经元,分为未处理对照组、DMSO溶剂对照组,1、5、10Ixmol/LAsA组,分别用0、1、5、10μmol/LAs2O3,溶液染毒,未处理对照组只加人培养液。染毒8h后,用流式细胞术检测神经细胞凋亡率,实时荧光定量PCR法检测calpain1、ca|pain2、cdk5、p35基因的表达,用蛋白免疫印迹法(Westernbot)检测calpainl、calpain2、cdk5和p35以及p25的蛋白表达水平。结果与未处理对照组和溶剂对照组比较,5和10μmol/LAs2O3染毒组细胞凋亡率明显增加,差异有统计学意义(P〈0.05)。1、5和10μmol/LAs2O3染毒组calpain1基因表达量分别为(6.36±3.26),(7.11±5.13)和(7.47±2.59),cdk5基因表达量分别为(1.27±0.19)、(1.54±0.04)和(1.79±0.21),明显高于未处理对照组[(0.72±0.15)、(1.77±0.87)]和溶剂对照组(0.96±1.23)、(1.18±0.09)],差异有统计学意义(P〈O.05);1和5μmol/LAs2O3染毒组p35的基因表达量[(2.17±0.59)、(2.51±0.51)]、明显高于未处理对照组(1.26±0.37),差异有统计学意义(P〈0.05);1、5和10Ixmol/LAs20,染毒组calpain1蛋白表达量分别为(0.37±0.10)、(0.42±0.13)和(0.51±0.18),明显高于未处理对照组(0.11±0.08)和溶剂对照组(0.13±0.07),差异均有统计学意义(P〈0.05)。5和10μmol/LAs2O3染毒组cdk5蛋白表达量分别为(0.34±0.12)和(O.37±0.21),p25蛋白表达量分别为(0.31±0.23)和(0.55±0.16),明显高于未处理对照组和溶剂对照组,差异均有统计学意义(P〈0.05);5和10μmol/LAs2O3,染毒组p35的蛋白表达量分别为(0.31±0.23)和(0.26±0.16),明显低于未处理对照组和溶剂对照组,差异均有统计学意义(P〈0.05);各组间calpain2的基因和蛋白表达的差异均无统计学意义(P〉0.05)。结论calpain1-calkS/p25途径可能参与As2O3诱导的神经细胞凋亡过程。

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