慢性肾功能衰竭大鼠主动脉核因子kB活化及泛素通路的调节作用

来源 :中华肾脏病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sunx
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目的 探讨慢性肾功能衰竭大鼠主动脉泛素(Ub)-NF-kB通路的表达变化规律。方法将大鼠随机分为假手术对照组(CON)、肾功能衰竭组(CRF)、肾功能衰竭加MG-132干预组(CRF+M),观察6个月。采用部分肾动脉结扎加对侧肾切除法复制慢性肾功能衰竭大鼠模型。ELISA法测定血液中炎性因子白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量。RT-PCR半定量测定主动脉中NF-kB及Ub mRNA表达。免疫组织化学方法检测主动脉中NF-kB及Ub蛋白表达。Western印迹法测定主动脉泛素化蛋白的含量。凝胶电泳迁移率(EMSA)法测定动脉中NF-kB的活化情况。结果与CON组比较,CRF组大鼠术后4~6个月时血清中IL-lβ[(9.02±1.29)比(2.74±0.96)mg/L]和TNF-α[(50.02±9.52)比(14.04±1.29)mg/L]水平显著升高(P〈0.01);主动脉NF-kB、Ub的mRNA表达升高1.38倍和1.29倍(P〈0.01);NF-kB、Ub的蛋白质表达升高3.75倍和20.5倍(P〈0.01);NF-KB活性增强1.82倍(P〈0.01),术后6个月各指标均有进一步上升趋势。与CRF组比较,CRF+M组大鼠干预治疗4~6个月后,大鼠血清中IL-lβ[(2.94±0.33)mg/L]和TNF-d[(12.80±2.12)mg/L]含量显著下降(P〈0.01);NF-kB、Ub的mRNA及蛋白质表达显著减少(P〈0.01);NF-KB的活性显著降低(P〈0.01),与CON组比较,差异已无统计学意义,而主动脉中泛素化蛋白含量显著升高(P〈0.01)。结论慢性肾功能衰竭大鼠主动脉泛素.NF-KB炎性反应信号明显活化,抑制蛋白酶体活性可能是降低主动脉NF-KB活化的重要药物靶点。

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