【摘 要】
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为获取人PD-L1Ig融合蛋白,研究其对T细胞的调节效应,采用PCR法从pMD18-T/PD-L1中扩增出人PD-L1基因的胞外段序列,从人脾脏细胞中扩增出人IgG1 Fc恒定区基因,两者拼接后插入逆
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为获取人PD-L1Ig融合蛋白,研究其对T细胞的调节效应,采用PCR法从pMD18-T/PD-L1中扩增出人PD-L1基因的胞外段序列,从人脾脏细胞中扩增出人IgG1 Fc恒定区基因,两者拼接后插入逆转录病毒载体pEGZ-Term,用脂质体法与两个辅助病毒载体共转染293T包装细胞,用含病毒颗粒的培养上清反复感染L929细胞,Zeocin筛选能稳定分泌人PD-L1Ig蛋白的基因转染细胞并亚克隆之,经无血清培养,收集的上清用Dot blot检测、ELISA定量后,浓缩并经Protein G柱纯化,再经Wes
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