【摘 要】
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【目的】构建甜瓜e IF4E基因的CRISPR-Cas9植物基因编辑系统的gRNA表达载体。为研究eIF4E基因功能奠定基础。【方法】以新疆主栽甜瓜皇后为材料,在eIF4E基因的第一个外显子区
【机 构】
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新疆大学生物工程研究中心,新疆农业科学院生物质能源研究所,新疆喀什大学
【基金项目】
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国家自然科学基金项目“甜瓜抗白粉病基因挖掘与聚合育种”(31260258),国家自然科学基金项目“甜瓜果实糖积累的遗传学与关键调控因子研究”(31660297),自治区自然科学基金项目“哈密瓜抗白粉病、霜霉病新种质的分子选育”(2016D01C066)
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【目的】构建甜瓜e IF4E基因的CRISPR-Cas9植物基因编辑系统的gRNA表达载体。为研究eIF4E基因功能奠定基础。【方法】以新疆主栽甜瓜皇后为材料,在eIF4E基因的第一个外显子区设计gRNA引物,以载体pP1C.4为模板,扩增获得sgRNA克隆框,使用EcoR I、XbaI双酶切pP1C.4载体,利用DNA重组酶构建重组载体p P1C.4-eIF4E。【结果】经菌落PCR检测和测序,gRNA已经成功连接到植物基因敲除载体pP1C.4。【结论】构建了植物基因敲除载体pP1C.4-e IF4E,pP1C.4-e IF4E能对eIF4E基因进行定向编辑。
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