【摘 要】
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为了克隆山羊β-酪蛋白基因的调控区并检测5'调控区的启动子活性,利用Long PCR技术对西农莎能奶山羊β-酪蛋白基因(CSN2)5'和3'调控区进行了克隆(5'调控区分两段进行克隆,3'调控区进
【出 处】
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西北农林科技大学学报(自然科学版)
【基金项目】
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国家“863”高技术项目(2004AA213072)
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为了克隆山羊β-酪蛋白基因的调控区并检测5'调控区的启动子活性,利用Long PCR技术对西农莎能奶山羊β-酪蛋白基因(CSN2)5'和3'调控区进行了克隆(5'调控区分两段进行克隆,3'调控区进行直接克隆)、测序,将克隆的5'调控区的两个片段通过共有的单一性酶切位点HindⅢ融合成一个长为6.7 kb的片段,用其替代表达载体pEGFP-C1上原来的启动子CMV,指导报告基因绿色荧光蛋白(GFP)在山羊乳腺上皮细胞中的瞬时表达。结果表明,克隆的GC 3.3、GC 4.3、GC 6.6 3个片段与GenBa
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