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目的羊水染色体核型分析是产前诊断染色体疾病的金标准,但由于羊水培养的影响因素较多,故其成功率较低。探讨影响羊水细胞原位培养成功率的相关因素,探索核型制备的条件,建立一种成功率高且较为稳定的羊水细胞染色体制备方法。方法对具有产前诊断指征的435例孕妇行羊膜腔穿刺术抽取羊水进行细胞培养。根据羊水沉淀物的颜色和大小分为5～10 mm~3白色团块、5～10 mm~3棕色团块、10～15 mm~3棕色团块、5～10 mm~3鲜红色团块、10～15 mm~3鲜红色团块组,根据采集羊水过程中使用器具的材质分为塑料组、塑料联合玻璃组、玻璃组,各30例,分析羊水离心后沉淀情况及不同材质操作器具的培养结局。选取培养良好的培养瓶和培养皿共100例,根据制片时环境温度和湿度分为20℃室湿20%组(室温:20℃,室湿:20%)、28℃室湿20%组、20℃湿度50%组、28℃湿度50%组,每组25例,对核型制备过程中不同温度和湿度下的核型分散程度评分。结果 435例羊水培养中成功406例,培养成功率93.3%。培养结果显示,10～15mm~3棕色团块组和10～15mm~3鲜红色团块组细胞培养成功率(72.72%、56.25%)较5～10 mm~3白色团块组培养的成功率(95.98%)明显降低(P<0.01);10～15 mm~3鲜红色团块组细胞培养成功率较5～10 mm~3鲜红色团块组培养的成功率明显降低(56.25%vs 90.48%,P<0.01)。塑料组和塑料联合玻璃组细胞培养成功率(56.67%、70.00%)较玻璃组细胞培养成功率(93.33%)均明显降低(P<0.01)。20℃室湿20%组、28℃室湿20%组、20℃湿度50%组载玻片核型分散程度的得分[(52.48±2.44、66.36±2.25、71.60±2.34)分]明显低于28℃湿度50%组[(86.36±1.59)分],差异有统计学意义(P<0.01);20℃室湿20%组、28℃室湿20%组载玻片核型分散程度的得分明显低于20℃湿度50%组(P<0.01)。结论对于有明显鲜血性的羊水,立即加入0.5 mL无菌肝素可提高羊水培养的成功率;全部采用玻璃器具可有效地提高羊水细胞培养的成功率;控制好分散过程中环境的温度和湿度(28℃、50%),可以制作出合格的核型分析载玻片。