【摘 要】
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目的 探讨长链非编码RNA生长停滞特异性转录本5(lncGAS5)在同型半胱氨酸(Hcy)致肝细胞自噬中的作用.方法 体外培养HL7702人肝细胞,分为对照组和Hcy组.Western blot法检测自噬
【机 构】
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宁夏医科大学临床医学院;国家卫生健康委代谢性心血管疾病研究重点实验室;宁夏血管损伤与修复研究重点实验室;国家卫生健康委代谢性心血管疾病研究重点实验室;宁夏血管损伤与修复研究重点实验室;宁夏医科大学基础
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目的 探讨长链非编码RNA生长停滞特异性转录本5(lncGAS5)在同型半胱氨酸(Hcy)致肝细胞自噬中的作用.方法 体外培养HL7702人肝细胞,分为对照组和Hcy组.Western blot法检测自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)和P62的表达水平,转染携带双荧光蛋白和LC3(mRFP-GFP-LC3)基因的腺病毒,激光扫描共聚焦显微镜技术观察细胞内自噬流水平变化,实时荧光定量PCR检测lncGAS5的表达水平.转染lncGAS5小干涉RNA(si-lncGAS5)及阴性对照小干涉RNA(si-NC),并用Hcy处理,再次检测LC3B和P62及自噬体的变化.结果 与对照组比较,Hcy组LC3B Ⅱ/LC3B Ⅰ比值增加,P62蛋白表达降低,细胞内自噬体及自噬溶酶体数量增加,lncGAS5表达升高.敲低lncGAS5后,LC3B Ⅱ/LC3B Ⅰ比值减小,P62蛋白表达升高,细胞内自噬体及自噬溶酶体数量减少.结论 lncGAS5促进Hcy致肝细胞自噬.
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