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目的
检测嘌呤受体P2X7信使RNA(mRNA)及其蛋白在RGC-5细胞系的表达。设计合成针对P2X7受体的小型干扰RNA(siRNA)，并筛选出其中能高效抑制其表达的序列。
方法采用RT-PCR、Western blot及免疫荧光检测P2X7受体mRNA及蛋白在RGC-5细胞系中的表达情况，并与小鼠视网膜及其他组织进行比较。设计针对P2X7受体的3对干扰序列(P2X7-siRNA-1～3)，使用riboFECT™CP转染RGC-5细胞，60 h后检测细胞中P2X7受体mRNA及蛋白表达变化。
结果RGC-5细胞系与小鼠视网膜组织均能检测到P2X7受体mRNA及蛋白的表达，且该受体主要表达于RGC-5的细胞核和细胞质。P2X7-siRNA-3可同时有效下调P2X7的mRNA和蛋白的表达。
结论RGC-5可作为体外研究P2X7受体作用的细胞模型。成功筛选出的针对P2X7受体基因的siRNA将为后续下调该受体、减轻青光眼性视神经病变的基因治疗奠定基础。