抑制14-3-3ζ表达的siRNA及其重组腺相关病毒载体的构建

来源 :安徽农业科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：frankcody

【摘要】

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[目的]通过构建靶向14-3-3ζ的siRNA及其报告基因EGFP的重组腺相关病毒载体,包装出含有目标基因的腺相关病毒。[方法]设计靶向14-3-3ζ的siRNA,插入到psiRNA质粒H1启动子下游

【作者】

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袁亚丽曹以诚高强杨磊

【机构】

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华南理工大学生物科学与工程学院

【出处】

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安徽农业科学

【发表日期】

：

2011年23期

【关键词】

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[目的]通过构建靶向14-3-3ζ的siRNA及其报告基因EGFP的重组腺相关病毒载体,包装出含有目标基因的腺相关病毒。[方法]设计靶向14-3-3ζ的siRNA,插入到psiRNA质粒H1启动子下游,Western-Blot检测siRNA的抑制效果。从psiRNA质粒上扩增H1-si-ζ基因表达单位亚克隆到AAV表达质粒AAV-MCS-EGFP的Mlu1酶切位点,构建重组质粒pAAV-14-3-3ζ-EGFP。重组质粒与包装质粒pAAV-RC和辅助质粒pHelper用磷酸钙法共转染AAV-293细胞制备

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