【摘 要】
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本研究探讨3-溴丙酮酸增加人乳腺癌他莫昔芬耐药细胞MCF-7/TR对他莫昔芬敏感性的作用及机制.4-羟基他莫昔芬(4-OHT)是他莫昔芬在体内的活性形式,本研究采用4-OHT进行实验.MTT
【机 构】
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贵州医科大学天然药物资源优效利用重点实验室,贵州省高等学校天然药物药理与成药性评价重点实验室,贵州贵阳550025
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本研究探讨3-溴丙酮酸增加人乳腺癌他莫昔芬耐药细胞MCF-7/TR对他莫昔芬敏感性的作用及机制.4-羟基他莫昔芬(4-OHT)是他莫昔芬在体内的活性形式,本研究采用4-OHT进行实验.MTT实验检测3-溴丙酮酸对MCF-7/TR细胞活力的影响,并通过显微镜观察细胞形态,选用对MCF-7/TR细胞的无毒剂量进行研究;检测4-OHT单用或联合3-溴丙酮酸处理MCF-7/TR耐药细胞的IC50,计算逆转耐药倍数;乳酸检测试剂盒检测MCF-7和MCF-7/TR细胞的乳酸水平;Western blot实验检测MCF-7和MCF-7/TR细胞中葡萄糖转运蛋白1(glucose transporter 1,GLUT1)、己糖激酶2(hexokinase 2,HK2)、乳酸脱氢酶A(lactate dehydrogenase A,LDHA)的表达水平.结果 显示,40 μmol·L-1的3-溴丙酮酸对MCF-7/TR细胞活力无明显影响;3-溴丙酮酸可显著增加4-OHT对MCF-7/TR耐药细胞的抑制作用,其逆转耐药倍数为1.91倍;MCF-7/TR耐药细胞中乳酸水平和GLUT1、HK2、LDHA蛋白的表达显著高于MCF-7细胞;与单用4-OHT相比,联用3-溴丙酮酸显著减少了MCF-7/TR耐药细胞中乳酸水平及GLUT1、HK2、LDHA蛋白的表达.以上研究结果表明,3-溴丙酮酸可增加MCF-7/TR耐药细胞对他莫昔芬的敏感性,其机制与抑制有氧糖酵解有关.
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