银染法和鬼笔环肽染色观察不同发育阶段小鼠骨细胞突触

来源 :南方医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:a1133e43
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的 采用银染法和鬼笔环肽染色方法探究骨细胞突触在不同发育阶段的组织形态并探讨两种染色方法在观察小鼠骨细胞不同发育阶段形态中应用价值.方法 取出生后0 d(P0)、5 d(P5)、15 d(P15)、21 d(P21)、28 d(P28)、35 d(P35)野生型小鼠的肱骨、股骨,制备冰冻切片及石蜡切片.对P35小鼠的股骨切片进行H&E染色,作为观察骨小梁和皮质骨中骨细胞的参照.对其他时期的肱骨组织切片采用银染法染色观察骨细胞和骨小管的形态,并记录各时期小鼠肱骨骨皮质和骨小梁中骨小管的长度.选取P10、P15两个时期小鼠肱骨的冰冻切片进行鬼笔环肽iFlour-488染色,观察骨细胞的形态,并记录骨皮质中骨细胞突触的长度.结果 通过银染法染色,在P0~P15时期的小鼠肱骨骨小梁中,我们仅能观察到骨细胞轮廓,无法观察到骨小管的形态.在P21后,通过银染法可以观察到骨小梁骨细胞及骨小管的形态,且骨细胞周围骨小管的长度随年龄逐渐变长,P21 vs P28(P<0.05),P21 vs P35(P<0.05),排列整齐.在P15时期的小鼠肱骨骨皮质中,通过银染法即可以观察到骨细胞及骨小管的形态,且骨细胞周围骨小管的长度随年龄逐渐变长,P15 vs P21(P<0.005),P15 vs P28(P<0.0001),P15 vs P35(P<0.0001),排列整齐.采用鬼笔环肽iFlour-488染色,可以观察到P10和P15时期骨细胞的完整形态,骨细胞突触随着年龄增加逐渐变长,P10 vs P15(P<0.01),与周围骨细胞连接.结论 小鼠骨细胞突触随骨骼发育长度逐渐加长、排列逐渐整齐.银染法可以观察成年后骨细胞及骨小管的形态,对生长发育早期的骨小管形态显像不足.鬼笔环肽染色标记细胞骨架的方法适用于生长发育各时期的骨细胞染色,可以实现在发育早期对骨细胞的形态的检测.
其他文献
目的 通过超声实时监测胃窦进气情况,评估快充式经鼻湿化高流量通气(THRIVE)在全身麻醉诱导时对肥胖患者胃进气的影响.方法 纳入90例于全麻下行腹腔镜胆囊手术的肥胖患者,BMI
100km远距离测距的激光雷达,由于作用距离远,多采用低重复频率、高能量激光器配合大口径望远镜实现远程激光测距,导致系统存在体积大、重量大、功耗高等缺点。基于光子计数技
研究目的:心脏骤停后综合症(PCAS)是心脏骤停后,机体在非自然状态下(人工心肺复苏)自主循环恢复(ROSC)后出现的一种特殊病理生理状态,病理生理复杂,包括心脏骤停后脑损伤、心肌功能异常、全身性缺血-再灌注损伤和持续诱发性病变,临床治疗效果不甚理想,预后差,病死率高。由于医疗技术水平的不断提高,使得越来越多的院外心脏骤停的病人能得到及时有效的心肺复苏(CPR),虽然自主血压恢复,但仍有数小时的昏