【摘 要】
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目的探讨Rad9错配修复功能与结直肠癌发生的关系。方法收集100例结直肠癌患者肿瘤样本，采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测hRad9基因突变，采用快速点突变方法构建hRad9 L101M点突变质粒并转染Rad9基因敲除的小鼠细胞，采用Western blot方法检测Rad9表达，采用错配修复报告质粒及流式细胞仪检测活细胞错配修复能力。结果100例结直肠癌患者中，有7例发现了hRad9基因1
【机 构】
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101149 首都医科大学附属北京潞河医院肿瘤科,100101 北京，中国科学院生物物理研究所蛋白质与多肽药物所重点实验室,100029 北京，中国计量科学研究院 化学计量与分析科学研究所,07275
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目的探讨Rad9错配修复功能与结直肠癌发生的关系。
方法收集100例结直肠癌患者肿瘤样本，采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测hRad9基因突变，采用快速点突变方法构建hRad9 L101M点突变质粒并转染Rad9基因敲除的小鼠细胞，采用Western blot方法检测Rad9表达，采用错配修复报告质粒及流式细胞仪检测活细胞错配修复能力。
结果100例结直肠癌患者中，有7例发现了hRad9基因101位氨基酸由亮氨酸突变为甲硫氨酸。mRad9－/－＋L101M细胞(表达hRad9-L101M突变体的Rad9基因敲除小鼠细胞)和mRad9－/－＋hRad9细胞(表达hRad9的Rad9基因敲除小鼠细胞)的错配修复效率分别为(34.0±5.6)%和(48.0±7.5)%，差异有统计学意义(P<0.05)。用N-甲基亚硝脲(MNU)处理细胞后， mRad9－/－＋L101M细胞和mRad9－/－＋hRad9细胞的存活率分别为(33.7±5.9)%和(21.3±4.7)%，差异有统计学意义(P<0.05)。hRad9基因101位氨基酸突变导致细胞错配修复效率下降及对MNU的抗性增加。hRad9基因多处翻译后修饰位点突变导致细胞错配修复能力下降。
结论hRad9错配修复功能缺陷可能与结直肠癌发生有关。
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