【摘 要】
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本研究拟探讨miR-204-5p在人脑胶质瘤血管新生中的作用和机制.首先,本研究合成了miRNA阴性对照(NC)和miR-204-5p模拟物(miR-204-5p mimic),并转染U251细胞制备肿瘤细胞条件培
【机 构】
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重庆三峡医药高等专科学校,重庆,404120
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本研究拟探讨miR-204-5p在人脑胶质瘤血管新生中的作用和机制.首先,本研究合成了miRNA阴性对照(NC)和miR-204-5p模拟物(miR-204-5p mimic),并转染U251细胞制备肿瘤细胞条件培养基,通过管样形成实验和Transwell实验检测两种条件培养基对人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)血管新生和侵袭的影响;其次,通过双荧光素酶报告实验验证miR-204-5p对ANGPT1活性的影响,通过Western blotting检测miR-204-5p上调对U251细胞中ANGPT1蛋白表达的影响;最后,在miR-204-5p上调的U251细胞中分别转染过表达对照(con)和ANGPT1过表达载体(ANGPT1),通过管样形成实验和Transwell实验验证miR-204-5p是否通过ANGPT1调节HUVECs血管新生和侵袭.研究结果表明,与NC组相比,miR-204-5pmimic组条件培养基明显抑制HUVECs管样形成和侵袭能力(p＜0.01);双荧光素酶报告实验结果表明miR-204-5p直接靶向调控ANGPT1 3'UTR活性;同时,miR-204-5p上调明显抑制U251细胞中ANGPT1蛋白的表达(p＜0.01);ANGPT1过表达可以恢复miR-204-5p上调对HUVECs管样形成和侵袭能力的影响.上述结果表明miR-204-5p通过调节ANGPT1影响人脑胶质瘤血管新生.
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