【摘 要】
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采用高碘酸钠氧化法分别合成重楼皂苷Ⅲ的免疫抗原(POLⅢ-BSA)和包被抗原(POLⅢ-OVA)。通过薄层色谱法和紫外光谱鉴定人工抗原偶联成功,并用POLⅢ-BSA免疫小鼠,使小鼠体内产
【机 构】
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北京中医药大学基础医学院,北京中医药大学“经典方剂的应用基础研究”创新团队,北京中医药大学中药学院,北京中医药大学科研实验中心,
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采用高碘酸钠氧化法分别合成重楼皂苷Ⅲ的免疫抗原(POLⅢ-BSA)和包被抗原(POLⅢ-OVA)。通过薄层色谱法和紫外光谱鉴定人工抗原偶联成功,并用POLⅢ-BSA免疫小鼠,使小鼠体内产生抗重楼皂苷Ⅲ(polyphylinⅢ,POLⅢ)的抗体,效价1∶16 000以上,线性范围为1 ng·L-1~100μg·L-1,并测定了POLⅢ与重楼皂苷Ⅰ(POLⅠ)、重楼皂苷Ⅱ(POLⅡ)、重楼皂苷Ⅶ(POLⅦ)的交叉反应。实验成功合成了POLⅢ的人工抗原,为制备POLⅢ的单克隆抗体以及建立快速、便捷的免疫分析方法奠定基础。
The immune antigen (POL Ⅲ-BSA) and the coating antigen (POL Ⅲ-OVA) were synthesized by sodium periodate oxidation method. Antibodies against polyphylin Ⅲ (POLⅢ) were produced in mice by immunofluorescence staining with thin-layer chromatography and UV spectrophotometry. The titer of the antibody was 1:16 000 and the linearity The range was 1 ng · L-1 ~ 100 μg · L-1, and the cross-reaction of POL Ⅲ with POL Ⅰ, POL Ⅱ and POL VII was measured. The experiment successfully synthesized the artificial antigen of POL Ⅲ, which laid the foundation for the preparation of the monoclonal antibody against POL Ⅲ and the establishment of a rapid and convenient immunoassay.
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