【摘 要】
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目的:建立检测TT病毒(TTV)DNA快速、敏感、特异的PCR-ELISA方法.方法:将生物素标记的PCR产物与地高辛标记的特异性探针杂交.通过酶免疫显色反应测出A值.判断TTV感染情况.优化
【机 构】
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南宁中心血站,530003北京现代高达生物技术有限责任公司,100055;
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目的:建立检测TT病毒(TTV)DNA快速、敏感、特异的PCR-ELISA方法.方法:将生物素标记的PCR产物与地高辛标记的特异性探针杂交.通过酶免疫显色反应测出A值.判断TTV感染情况.优化反应条件,与PCR电泳结果比较,测定方法的敏感性,并检测325份正常人群、甲～庚型肝炎、非甲～庚型肝炎血清标本.确定该方法的特异性.结果:本实验的最佳杂交时间为45 min,最佳探针浓度为4 pmol/mL.该方法的检测阈值为50 fg/霯TTV DNA,其灵敏度是PCR电泳法的10倍,检测TTV在正常人群、甲～庚型肝炎、非甲～庚型肝炎血清标本中的阳性率分别为2.4%、29.3%、25.O%,与PCR电泳检出结果差异无显著性(P>0.05).结论:PCR-ELISA是一种快速、敏感、特异的检测方法,可用于临床TTV感染的诊断.
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