【摘 要】
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目的 构建可抑制 Vimentin基因表达的 siRNA并转染进入人肝门部胆管癌 QBC939 细胞株,初步鉴定siRNA的干扰效果.方法 设计并合成 Vimentin(NM-003380)基因的可作用于不同位点的 3 种 siRNA及一组 siR-NA阴性对照序列,使用脂质体法将 3 种不同的 siRNA序列及阴性对照序列瞬时转染进入人肝门部胆管癌 QBC939细胞,分别命名为T1 组(siVIM-1)、T2 组(siVIM-2)、T3 组(siVIM-3)及 NC组(siCtrl),使用 RT-PCR
【机 构】
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内蒙古医科大学研究生学院,内蒙古 呼和浩特010110;内蒙古自治区人民医院临床医学研究中心,内蒙古 呼和浩特010110;内蒙古自治区人民医院肝胆胰脾外科,内蒙古 呼和浩特010110
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目的 构建可抑制 Vimentin基因表达的 siRNA并转染进入人肝门部胆管癌 QBC939 细胞株,初步鉴定siRNA的干扰效果.方法 设计并合成 Vimentin(NM-003380)基因的可作用于不同位点的 3 种 siRNA及一组 siR-NA阴性对照序列,使用脂质体法将 3 种不同的 siRNA序列及阴性对照序列瞬时转染进入人肝门部胆管癌 QBC939细胞,分别命名为T1 组(siVIM-1)、T2 组(siVIM-2)、T3 组(siVIM-3)及 NC组(siCtrl),使用 RT-PCR、Q-PCR技术测定实验中各组细胞Vimentin在mRNA水平上的表达情况.结果 T1、T2 及T3 组 Vimentin在基因表达水平上均较NC组受到抑制,T2 组的抑制效果较T1 及T3 组更明显,差异具有统计学意义(P＜0.01).结论 成功建立并筛选出人肝门部胆管癌细胞 QBC939 细胞 Vimentin基因的 siRNA.为后续进一步研究 Vimentin的生物学特性及在肝门部胆管癌 QBC939 细胞中的作用奠定了基础.
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