【摘 要】
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通过基因工程的方法将人表皮生长因子(EGF)和TAT分别修饰于FTH1亚基的N端,采用原核表达系统可获得EGFR靶向修饰的铁蛋白重链亚基蛋白(EGF∷FTH1)和修饰有穿膜肽的铁蛋白重链
【机 构】
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华东理工大学生物工程学院生物反应器工程国家重点实验室,上海化学试剂研究所有限公司,
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通过基因工程的方法将人表皮生长因子(EGF)和TAT分别修饰于FTH1亚基的N端,采用原核表达系统可获得EGFR靶向修饰的铁蛋白重链亚基蛋白(EGF∷FTH1)和修饰有穿膜肽的铁蛋白重链亚基蛋白(TAT∷FTH1)。随后,将变性的EGF∷FTH1与TAT∷FTH1以一定比例混合进行复性得到TAT/EGF-FTH1双功能化的纳米粒子。荧光显微镜的结果表明,TAT的修饰能有效增强纳米粒子的内化效果。
Human epidermal growth factor (EGF) and TAT were modified to the N terminus of FTH1 subunit by genetic engineering respectively. EGFR targeted modified ferritin heavy chain subunit protein (EGF :: FTH1) and its modification were obtained by using prokaryotic expression system There are membrane-penetrating ferritin heavy chain subunit proteins (TAT :: FTH1). Subsequently, the denatured EGF :: FTH1 and TAT :: FTH1 were mixed and refolded in a certain ratio to obtain TAT / EGF-FTH1 dual-functionalized nanoparticles. Fluorescence microscopy showed that the modification of TAT can effectively enhance the internalization of nanoparticles.
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