草鱼消化道碱性蛋白酶的提取及鉴定

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用丙酮将草鱼肠脱脂,磷酸盐缓冲溶液提取粗酶液,再用10%-40%饱和度的硫酸铵分级沉淀制取粗草鱼消化道碱性蛋白酶。粗草鱼碱性蛋白酶的比活力为2800U/g,最适作用温度为37℃,最适作用pH为10.3。在50℃保温30min后还保留60%以上的酶活力,要使其损失约80%的活力,需要在60℃保温30min。50mmol/L的甲苯磺酰赖氨酸氯甲酮(TLCK)、甲苯磺酰氟(PMSF)和50μmol/L大豆胰蛋白酶抑制因子(SBTI)分别抑制78.92%、75.98%和80.23%的酶活力。SDS-底物-聚丙烯酰
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