泛素特异性蛋白酶2a的表达及催化机制

来源 :西北大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户：asd03071128

【摘要】

：

研究USP2a在肿瘤发生发展中的催化机制，设计引物对USP2a的关键氨基酸残基Asn218,Cys223，His464和Ash482进行点突变，分析突变后对USP2a催化活性以及底物特异性的影响。利用荧光检

【作者】

：

张万方

【机构】

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新乡学院生命科学技术学院

【出处】

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西北大学学报(自然科学版)

【发表日期】

：

2017年4期

【关键词】

：

泛素特异性蛋白酶2 酶活性分析 Ub-AMC Di—Ub ubiquitin-specific protease2 activity analysis Ub-A

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研究USP2a在肿瘤发生发展中的催化机制，设计引物对USP2a的关键氨基酸残基Asn218,Cys223，His464和Ash482进行点突变，分析突变后对USP2a催化活性以及底物特异性的影响。利用荧光检测方法测定USP2a-WT和USP2a-Ms的酶促动力常数，并采用LC-MS／Ms与SDS-PAGE方法分析USP2a-WT和USP2a-Ms的异肽酶活性，获得了可溶性表达的USP2a-wT和USP2a-Ms重组蛋白。结果表明，氨基酸残基Cys223和His464突变后酶失去活性，其余突变体分解底物Ub

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