【摘 要】
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目的 观察大麻素受体CB2选择性抑制剂-AM630对核因子(NF)-κB受体活化因子配体(RANKL)诱导的小鼠单核/巨噬细胞株RAW264.7向破骨细胞分化的影响.方法 实验分3组,即空白组,诱
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目的 观察大麻素受体CB2选择性抑制剂-AM630对核因子(NF)-κB受体活化因子配体(RANKL)诱导的小鼠单核/巨噬细胞株RAW264.7向破骨细胞分化的影响.方法 实验分3组,即空白组,诱导组和药物组.采用噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度AM630(0、50、100、200 nmol/L)刺激RAW264.7后24、48、72 h的细胞增殖活性.以50μg/L RANKL诱导RAW264.7,6 d后加入100 nmol/LAM630再培养24 h;抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检测成熟破骨细胞,定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测量CPK、RANK基因mRNA含量,Western blot检测ERK及P-ERK表达水平.结果 MTT结果表明AM630浓度为50、100、200 nmol/L时对RAW264.7细胞增殖能力无影响.TRAP染色结果表明药物组成熟破骨细胞数(65.60±4.83)/cm2明显少于诱导组(181.00±6.86)/cm2,差异有统计学意义(P＜0.05).定量RT-PCR结果证实,诱导组CPK和RANK基因mRNA含量分别为18.50±5.12和12.70±2.61;加入AM630后,上述基因mRNA含量为7.00±1.03和4.80±1.25;差异有统计学意义(P＜0.05).Western blot检测显示,AM630能下调RANKL诱导的P-ERK表达水平.结论 大麻素受体CB2选择性抑制剂-AM630能有效地抑制RANKL诱导的RAW264.7向破骨细胞分化.
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